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绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)是引起绵羊传染性胸膜肺炎的主要病原体,其可导致患病绵羊高热、喘气、咳嗽、贫血、生长发育迟缓、渐进性消瘦和肺间质增生等。MO不但能感染绵羊,也能感染山羊。近年来,绵羊传染性胸膜肺炎已成为一种世界性的疾病,给养殖业造成了一定的经济损失,严重影响了养羊业的健康发展。在对肺炎支原体、丝状支原体丝状亚种SC型(M.mycoides subsp. mycoides SC)等研究中均认为甘油是支原体的主要碳源,其代谢产物H202是该菌的主要致病因素。而在H202的产生过程中,甘油-3-磷酸氧化酶(Glycerol3-phosphate oxidase,GLPO)起着重要作用。目前有关MO甘油代谢,以及在该代谢过程中,GLPO所起作用的研究尚属空白。因此,本研究在MO Y98株(ATCC29419)基因组学测定及分析的基础上,以该菌基因组作为模板,扩增获得了glpO基因全长,对该基因进行了生物信息学分析,并对其密码子进行优化,构建了其原核表达载体,实现了其在大肠杆菌系统中的可溶性表达,最后对其产物进行了初步鉴定及纯化,结果如下：1、对MO标准株Y98进行扩大培养,提取较高纯度的MOY98株全基因组,通过电泳检测,获得的基因组纯度较高,可以进行下一步试验。2、MO Y98株基因组作为模板,以glpO基因序列设计引物,PCR扩增获得glpO全长基因,将该基因插入到pMD(?)18-TT7启动子下游,测序后,对该序列进行了生物信息学分析。3、根据大肠杆菌密码子偏好性对glpO基因密码子进行碱基优化,亚克隆至pMD(?)18-T载体后,进一步构建了其原核表达载体pET28a-glpOM及相应的重组菌株BL21DE3(pET28a-glpOM),使用IPTG对重组菌株诱导后的产物进行SDS-PAGE及Western blot检测,得到融合蛋白为44kD。4、通过Ni柱对获得的目的蛋白粗提液进行纯化,纯化得到了目的蛋白。本实验成功的表达了重组GLPO,并初步对其进行了纯化,为后续的功能研究奠定了基础。