季铵盐类消毒剂具有杀菌浓度低、无色、无臭、无刺激性,低毒安全等优点,在医疗卫生、食品和日用化工等领域广泛应用。季铵盐类消毒剂的化学分析多数是含量测定,很少见到快速鉴别分析方法。这对消毒领域的日常监测造成不便。为此,我们在现有化学分析原理的基础上,经筛选、比较研究了季铵盐类消毒剂快速简便的鉴别方法。杀微生物剂是预防性传播疾病(STD)的重要方法之一,特别是艾滋病(AIDS)等病毒性疾病。杀微生物剂可以满足女性的预防需要,它可以局部用药于阴道和宫颈,能够杀灭或抑制包括HIV等病毒性和细菌性病原体,从而有效预防STD传播。为此,我们根据季铵盐消毒剂安全、有效杀精子对粘膜刺激性小等特点研制出一种凝胶剂型的新的杀微生物剂,具有美观、使用舒适、稳定性好、不污染衣物等优点。本课题分为两部分。第一部分∶首先通过季铵盐与指示剂混合试验筛选出指示剂,然后对指示剂与季铵盐显色反应中的干扰因素进行观察。最后经实际应用试验,确定快速鉴别方法的有效性。第二部分∶首先通过配伍试验筛选出杀微生物凝胶剂配方,然后,进行微生物杀灭规律试验、稳定性试验及pH值的测定,综合评价该杀菌凝胶剂的性能。现将主要结果总结如下:1季铵盐快速分析方法的研究⑴通过季铵盐与化学试剂混合观察试验,结果在七种化学试剂中,季铵盐与四苯硼钠生成白色沉淀;与铁氰化钾生成黄色沉淀;与曙红呈桃红色;与重铬酸钾生成黄色沉淀且不溶于稀硝酸;使百里酚蓝-亚甲基蓝从紫红色变为黄色,加入三氯甲烷后使有机层从无色变为黄色;使溴代底咪嗡-酸性蓝和溴化乙啶-酸性蓝有机层从无色变为蓝色。以上试剂均与季铵盐发生明显的化学反应,可用作定性鉴别分析的指示剂。⑵将可能影响显色的4种干扰物质戊二醛、醋酸氯己定、乙醇、异丙醇与季铵盐复配后,用四苯硼钠、铁氰化钾、曙红试液、重铬酸钾-稀硝酸、百里酚蓝-亚甲基蓝、溴化乙啶-酸性蓝试剂按试验方法检测。结果发现:四苯硼钠、铁氰化钾和曙红试液均与醋酸氯己定反应且现象与季铵盐相同,干扰了对季铵盐的鉴别;重铬酸钾-稀硝酸受乙醇和异丙醇的影响,遇季铵盐醇溶液呈阴性结果;只有百里酚蓝-亚甲基蓝和溴化乙啶-酸性蓝法不受干扰。⑶将按一定比例稀释后季铵盐溶液,分别用百里酚蓝-亚甲基蓝和溴化乙啶-酸性蓝法进行试验。结果显示:随着季铵盐浓度的降低,所显的颜色从阳性结果逐渐向阴性结果转变。百里酚蓝-亚甲基蓝方法1的灵敏度为0.01%,百里酚蓝-亚甲基蓝方法2和溴化乙啶-酸性蓝法的灵敏度均为0.001%。将上述四个干扰物与不同浓度季铵盐(1%、0.1%、0.05%、0.01%)复配后,按同样方法试验,结果显示:含有季铵盐的结果为阳性,不含的结果为非阳性,两者叠加对显色无任何影响。按上述方法分别对十个上市的消毒剂产品进行鉴别,结果发现:三种方法的鉴别结果与实际结果完全一致。2季铵盐杀菌凝胶剂的研究⑴通过化学配伍反应试验对五种凝胶基质进行筛选,结果:羟丙甲纤维素形成的凝胶有透明外观和较好的手感;卡波姆和海藻酸钠与苯扎溴铵配伍时均发生反应生成白色不溶物质,这是因为两种基质属于阴离子型化合物,与季铵盐阳离子发生化学反应,且海藻酸钠形成的凝胶为黄色;聚乙烯醇和羧甲基纤维素与苯扎溴铵配伍时不发生反应,但成型差且粘手,聚乙烯醇有出膜现象。⑵以苯扎溴铵和辛苯聚醇为主要成分,对制成不同浓度羟丙甲纤维素为基质的凝胶剂进行了比较研究。结果随着羟丙甲纤维素浓度的增加,粘度也在不断增加,0.5%的粘度较合适。综合考虑了外观形状、手感、粘度等各项因素,确立最终配方为苯扎溴铵0.2%,羟丙甲纤维素0.5%,辛苯聚醇0.5%,甘油2%。⑶配方对三种挑战微生物的杀灭效果。原液对金色葡萄球菌、铜绿假单胞菌作用0.5 min,平均杀灭对数值分别达到7.3940和7.4510;对白色念珠菌作用5 min,平均杀灭对数值达到5.1770。白色念珠菌存活量对数与凝胶剂作用时间的函数关系为:白色念珠菌为Y=5.6250-0.5538X ( r =-0.9011,P = 0.0368)。季铵盐凝胶剂每杀灭90%白色念珠菌个体所需时间(即D值)为1.8057min。⑷配方不同稀释度时杀灭微生物效果。配方1∶1稀释液作用0.5 min,对金色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的平均杀灭对数值分别达到7.3757和7.2613;以其1∶10稀释液作用0.5 min,对金色葡萄球菌的平均杀灭对数值为5.0537,作用3 min,平均杀灭对数值可达7.3879,其作用1 min,对铜绿假单胞菌的平均杀灭对数值达到5.7433,作用3 min,平均杀灭对数值可达7.3721。该配方的浓度系数为0.7781。⑸不同温度条件下,配方原液杀灭白色念珠菌的规律。在10～35℃试验条件下,季铵盐凝胶剂原液对白色念珠菌的杀灭对数值随温度的升高而上升。在不同温度下,白色念珠菌的存活对数与消毒液作用时间的函数关系分别为: 10℃时Y=6.1772-0.3901X ( r =-0.9000, P=0.0370 ),D值为2.5634min; 20℃时Y=5.6250-0.5538X ( r =-0.9011, P=0.0368 ),D值为1.8057min; 30℃时Y=6.5786-1.2222X ( r =-0.9659, P=0.0341 ),D值为0.8182min; 35℃时Y=6.3903-1.2482X ( r =-0.9523, P=0.0477 ),D值为0.8011min。平均温度系数Q10为1.8133。⑹在同一时间点季铵盐凝胶剂原液对白色念珠菌的杀灭对数值随有干扰物小牛血清含量的升高而下降。在不同浓度小牛血清作用下,白色念珠菌的存活对数与消毒液作用时间的函数关系分别为:小牛血清0%时, Y=4.2897-0.3512X ( r =-0.9561,P=0.0439);小牛血清25%时,Y=5.1351-0.4255X ( r=-0.9607,P=0.0393);小牛血清50%时,Y=5.1404-0.4162X( r =-0.9582,P=0.0418)。⑺配方稳定性测定采用加速试验法,将配好的凝胶剂放置54℃温箱14d后测试,苯扎溴铵的下降率仅为0.05%,产品的外观性状无任何变化,按《消毒剂技术规范》贮存有效期可为1年以上。