【摘 要】
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目的:探讨红景天苷（salidroside,SAL）对棕榈酸（palmitate acid,PA）诱导H9c2心肌细胞损伤的作用及分子机制。方法:体外用PA刺激H9c2心肌细胞制备心肌细胞脂毒性损伤模型。实验分为正常组、PA组以及SAL组。PA组给予PA 0.2 mmol·L-1作用细胞24 h;SAL组先用SAL 20mmo l·L-1干预1 h,再与PA 0.2 mmol·L-1联合处理24
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目的:探讨红景天苷（salidroside,SAL）对棕榈酸（palmitate acid,PA）诱导H9c2心肌细胞损伤的作用及分子机制。方法:体外用PA刺激H9c2心肌细胞制备心肌细胞脂毒性损伤模型。实验分为正常组、PA组以及SAL组。PA组给予PA 0.2 mmol·L-1作用细胞24 h;SAL组先用SAL 20mmo l·L-1干预1 h,再与PA 0.2 mmol·L-1联合处理24 h。四甲基偶氮唑盐（tetramethylazozoliun salt,MTT）比色法测定细胞活力;用试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性和丙二醛（malonaldehyde,MDA）含量;使用DHE、Annexin V-FITC/PI、JC-1染色检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平、细胞凋亡情况及线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）变化;Western blot法检测AMPK/m TOR/p70S6K通路蛋白及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3表达;实时荧光定量PCR法检测AMPK、m TOR、p70S6K m RNA表达水平。结果:1.与正常组相比,采用不同浓度PA以及不同时间刺激H9c2心肌细胞,PA以显著浓度和时间依赖效应降低了细胞活力。当用0.2 mmol·L-1PA刺激细胞24 h模拟高脂环境后,细胞存活率显著降低（P＜0.01）;细胞内SOD水平显著下降且MDA水平显著上升（P＜0.05）,细胞内ROS水平升高（P＜0.01）,细胞凋亡增加,MMP水平降低（P＜0.05）;凋亡相关蛋白Bax、cleaved caspase-3表达升高,Bcl-2表达降低（P＜0.05或P＜0.01）;AMPK m RNA和蛋白表达降低,m TOR、p70S6K m RNA和蛋白表达升高（P＜0.05或P＜0.01）。2.当分别加入不同浓度SAL预处理1 h后,与PA 0.2 mmol·L-1相比,细胞活力显著增加。当以终浓度SAL 20μmol·L-1预处理后,细胞活力明显增加（P＜0.01）;SAL预处理逆转了PA诱导的细胞内ROS和MDA水平升高及SOD活性降低,使MMP水平显著增加（P＜0.05或P＜0.01）,细胞凋亡减少;SAL下调了Bax、cleaved caspase-3表达,上调了Bcl-2表达（P＜0.05）;促进了AMPK m RNA和蛋白表达,抑制了m TOR、p70S6K m RNA和蛋白表达（P＜0.05或P＜0.01）。结论:SAL能改善PA诱导的H9c2细胞损伤,缓解氧化应激,减轻线粒体损伤,减少细胞凋亡,其作用可能是与AMPK/mTOR/p70S6K信号通路介导有关。
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