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本文在课题组前期研究基础上,对高粱根中两个具有抗凝血活性部位即醇提正丁醇萃取部位(N-butanol extraction site-BES)和水提醇沉上清部位(Water extract alcohol supernatant parts-WEAE)中的化学成分进行了分析,期望找到其中的活性成分;对两个活性部位中的化学成分进行了分离纯化,结构鉴定;以对羟基苯甲酸和香草酸为指标,对有效部位进行工艺优化;对高粱根提取物及单体化合物进行了体外抗血小板聚集活性评价;对高粱根提取物体外抗氧化活性进行了评价。主要研究内容如下:1、采用薄层色谱(TLC)结合HPLC法分析比较两个活性部位中的化学成分,发现两部位中含有相同成分。2、应用柱层析法对两活性部位的相同成分进行分离纯化,得到2个共有成分。经1HNMR、13CNMR、EI数据分析,与相关文献对照,鉴定化合物1为对羟基苯甲酸(4-Hydroxybenzenecarboxylic acid),化合物2为4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(4-Hydroxy-3-methoxybenzoic acid,又名香草酸),2个化合物均为首次从高粱根中分离得到。3、对新鲜高粱根和陈高粱根中的对羟基苯甲酸和香草酸含量进行比较,实验结果显示,新鲜高粱根BES和WEAE中对羟基苯甲酸和香草酸的含量都均低于陈高粱根中含量。4、利用AB-8、DM-301、D101、HPD-100、NKA-9五种大孔树脂对高粱根BES和WEAE部位进行富集工艺优化,确定了两个部位的富集工艺。对两个活性部位富集效果较好的均为NKA-9型树脂,其中BES洗脱条件为40%乙醇,上样质量比为1:25,流速为2 BV/h,洗脱溶媒两体积。WEAE洗脱条件为蒸馏水,上样质量与材料比为1:50,流速为3 BV/h,洗脱溶媒两体积。5、对两个部位进行了方法学考察并建立了10个高粱根品种BES和WEAE的HPLC特征图谱,实验结果得出,两个部位共有峰相似度均在0.85以上且有大部分峰的相似度在0.9以上,但共有峰面积RSD几乎大于10%。6、采用诱导剂三磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集,根据正常血小板最大聚集抑制率与加入样品后血小板最大聚集抑制率,来判断样品对血小板聚集有无抑制作用及作用强弱,以乙酰水杨酸(阿司匹林)作为阳性对照。通过公式对血小板聚集抑制率进行计算,得出了BES 10%乙醇流分、WEAE纯水流分、WEAE10%乙醇流分、对羟基苯甲酸(90%)+未知物、香草酸对ADP诱导的血小板聚集有抑制作用,其中BES纯水流分、WEAE 30%乙醇流分、40%乙醇流分、75%乙醇流分和水提粗提物(WCE)对ADP诱导的血小板聚集有微弱的抑制作用。7、采用水杨酸显色法、DPPH·法、铁氰化钾显色法对高粱根提取物进行体外抗氧化实验,以Vc作为阳性对照。实验结果表明,水提物的抗氧化活性较醇提物强且与酚酸类物质的含量成正相关。