论文部分内容阅读
成牙本质细胞是从牙胚的牙乳头间充质细胞或成熟牙髓细胞分化而来,其分化的过程和机理研究是牙髓生物学重要的研究方向之一。牙乳头间充质细胞作为牙胚发育过程中唯一具有分化为成牙本质细胞能力的间充质细胞群,已成为研究牙齿发育特别是成牙本质细胞分化和牙本质形成的重要模型。已知许多激素和生长因子参与牙胚的发育过程,对成牙本质细胞分化和牙本质形成有一定的调节作用。甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)是调节血钙使之维持在正常水平的一种重要物质,研究表明:PTH可引起牙髓细胞功能改变、影响牙本质形成。但其作用是通过调节血浆钙磷浓度间接影响牙齿的发育,或是直接调节成牙本质细胞分化、牙本质基质形成和矿化,有待于研究确定。本研究针对这些问题,采用现代细胞培养技术,利用体外建立的人成牙本质细胞的前体细胞—牙乳头间充质细胞的实验模型,结合处于成牙本质细胞分化关键时期的大鼠牙胚,以及摘除甲状旁腺后的大鼠,从细胞和基因水平上探讨PTH对牙乳头间充质细胞和牙胚的分化和矿化、以及对牙本质形成等的影响, 1 甲状旁腺激素对人牙乳头间充质细胞生物学特性影响的体外研究 采用的胚胎乳牙处于牙齿的形成期,由于部分牙本质硬组织已形成,机械分离牙组织与牙乳头,即可将外胚层组织与牙乳头分开,从而获取较为单一的牙乳头组织。细胞的生长状况和形态结构符合成纤维样细胞,第四代以后的细胞增殖稳定,细胞生长良好,适宜于进行各种实验观察。人牙乳头间充质细胞的培养成功,为进一步研究成牙本质细胞的分化、牙本质形成及其影响因素提供了重要的实验模型。 为观察人牙乳头间充质细胞在PTH诱导下的细胞增殖情况,采用流式细胞仪(FCM)分析、~3H-TdR掺入试验和透射电镜(TEM),观察和分析体外培养的人牙乳头间充质细胞经PTH作用后DNA合成、细胞周期和超微结构的变化情况。结果:与对照组相比,不同浓度的PTH均不影响体外培养的人牙乳头间充质细胞~3H-TdR掺入比例;各实验组的G1%、S%和反映细胞增殖活力的增殖指数PrI值亦无显著性差异;