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WRKY基因家族是一类在植物中起特异作用的转录调控因子,它被证明参与植物的抗病反应,还影响植物的衰老、抗胁迫以及生长、发育。启动子是基因表达调控的重要元件,启动子的活性间接反映了它所控制的基因的表达。为了掌握OsWRKY19和OsWRKY89这两个基因在各种反应中的调控作用,我们采用GUS报告基因对OsWRKY19和OsWRKY89动子的功能进行了分析。实验研究的主要内容包括以下两个部分: 1 OsWRKY19基因启动子的分析 根据网上预测的OsWRKY19基因设计引物从水稻（粳稻品种秀水11）中扩增了该基因的启动子部分,命名为OsW19p,将OsW19p的序列放在启动子顺式作用元件预测网站PLACE上进行分析,预测到了20多个可能存在的元件。构建了OsW19p和7个5′端缺失载体,将缺失载体分别命名为p105、p378、p678、p977、p1106、p1205和p1306。用农杆菌介导法将所有植物表达载体转化水稻,均获得了一定数量的转基因系。 实验中发现2,4-D强烈抑制OsW19p::GUS在愈伤阶段的表达,而其他缺失驱动的GUS的表达不被2,4-D抑制,推测在-1404～-1306bp间存在2,4-D反应元件,但在这个区间内没能预测到相关的元件,认为这个反应元件是一个新元件。用GUS荧光测定法测定T0代OsW19p和7个5′端缺失体转基因植株苗叶片中的GUS活性,结果证明在OsW19p片段中的-1404～-1306bp和-1205～-977bp区间内包含一些正调控作用元件,在-1306～-1205bp和-977～-378bp区间内包含一些负调控作用元件。 研究OsW19p::GUS在转基因植株中的组织特异性表达时发现:在转基因植株各个时期的叶片、茎和叶鞘中均可检测到GUS的表达;在花中是花粉无表达;成熟种子无表达;种子萌发即胚突破种皮时胚中有表达,胚芽鞘和种子根中均有表达,根尖中无表达;二叶一心期时种子根、不定根及它们的侧根中均有表达,但根尖均无表达;五叶期根部只有侧根中有表达,但根尖中均无表达。