高脂血症(Hyperlipidemia)是指人体内脂肪代谢异常,使血中动脉粥样硬化的脂质总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、载脂蛋白B(apo-B)和(或)脂蛋白(a) [(Lp(a)]增高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和(或)载脂蛋白A (apo-A)降低。高脂血症是动脉粥样硬化形成和发展的易患因素,而动脉粥样硬化是导致心脑血管疾病的病理基础,大量的研究资料表明,高脂血症是脑卒中、冠心病、心脏猝死独立而重要的危险因素,因此有效地控制高脂血症是防治心脑血管疾病的重要途径。针灸作为一种自然疗法,因其简、便、验、廉等优势在几千年的中医传统诊疗中起着十分重要的作用,且众多的研究也证实针灸具有良好的调节体内脂质代谢的作用,在治疗诸多现代疾病中已逐渐显示出优势。虽然目前针刺治疗高脂血症等临床研究工作开展得较多,但实验研究较少,从实验角度深入探讨针刺对高脂血症的影响作用,务求进一步揭示针刺防治高脂血症的作用机制,为针刺更好地应用于防治这一临床重要综合征提供重要的依据。本研究的开展可为针刺防治高脂血症提供系统的依据,为针刺这一具有我国中医特色的治疗方法治疗重大疾病提供重要的科学依据,也为中医药防治某些重大疾病的基础研究提供方法学的借鉴。本研究是前人研究的基础上,以高脂饮食复制高脂血症动物模型,结合现代检测技术,深入探讨针刺治疗高脂血症的作用机制。全文分文献研究、实验研究和小结三大部分进行。1.文献研究通过对大量关于高脂血症的文献综合研究,从高脂血症概念、高脂血症与相关疾病关系、高脂血症发生机理及防治等多方面阐述了高脂血症的最新研究进展,并对中西医药防治高脂血症的研究现状进行了分析,特别对针灸治疗高脂血症的国内外研究进展进行了综述,提出今后的研究方向,认为针刺不失为改善高脂血症的有效方法之一,应加强对其作用机理的深入研究和探讨。2.实验研究2.1方法2.1.1实验分组将30只雄性SD大鼠[体重(200±20g]以普通饲料进行适应性饲养1周,按体重随机分为3组,每组10只,分别为空白对照组、高脂血症模型组、针刺组。空白对照组以普通饲料喂养,其他各组均以高脂饲料饲养。从第6周开始,每隔1周空白对照组和高脂血症模型组大鼠从眼眶静脉窦采血1次,检测TG(甘油三酯)、TC(总胆固醇)、HDL-C(高密度脂蛋白)、LDL-C(低密度脂蛋白),并计算动脉粥样硬化指数进行对比,确定造模是否成功。第8周造模成功后,随后的3周,空白对照组以普通饲料喂养,模型组和针刺组以高脂饲料继续喂养,其中针刺组开始针刺治疗,1次／d。2.1.2取穴与针刺方法取穴：穴位选用“脂三针”(手厥阴心包经“内关”、足阳明胃经“足三里”、足太阴脾经“三阴交”)以及丰隆、肝俞。其定位参照大鼠的常用针灸穴位：“内关”位于前肢内侧,离腕关节约3mm左右的尺挠骨缝间；“足三里”位于大鼠后肢膝关节外下方当腓骨小头下约5mm处；“三阴交”位于大鼠后肢内踝尖直上10mm处；“丰隆”位于大鼠小腿骨的中点腓骨后缘,相当于丰隆穴肌肉中,“肝俞”位于大鼠后背第9胸椎棘突下两侧旁开5mm。刺法：内关、足三里、三阴交、丰隆均以30号1寸毫针(华佗牌,苏州医疗用品厂生产),沿皮斜刺8mm,针尖朝向肢体近端,肝俞直刺5mm,在内关、足三里、三阴交、丰隆穴,接电针治疗,将针柄分别连接至电针仪的电极上,电针仪采用华佗牌,苏州医疗用品厂生产的SDZ-II模型,采用疏密波,频率5-25Hz,强度以肌肉轻微抖为度,时间持续30分钟。每天1次,连续治疗21天。2.1.3样本处理及检测方法各组大鼠均于各阶段治疗结束后按规定的时间禁食12h过夜,检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),并计算动脉粥样硬化指数进行对比。最后一次于全部干预治疗结束后以戊巴比妥钠(35 mg/kg)腹腔麻醉,于腹腔静脉取血。检测相关指标：TG、TC、HDL-C、LDL-C,血液流变学相关指标、内皮素(ET)、一氧化氮(NO),超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。脱臼法处死大鼠,取一定量肝脏组织测定肝组织SOD、MDA、GSH-Px含量,留取肝脏左叶置10%福尔马林溶液中,酒精递度脱水,石蜡包埋,制成厚度为3mm切片,进行HE染色,光镜下观察形态结构。2.2结果2.2.1针刺对高脂血症大鼠体重及一般状况的影响在实验过程中,空白对照组大鼠体质量增长稳定,精神良好,反应灵敏,动作自如,毛发有光泽。第5周开始见,模型组、针刺组、大鼠性情变温顺,嗜睡少动,大鼠毛发蓬乱无光泽,大便量较正常组偏少,色灰,质较软,体重增长较快,较肥胖。模型组第8周后体重仍有增长,但增长速度小于前8周,且精神萎靡,反应迟钝,动作迟缓。针刺组从第9周开始给予针刺治疗,但仍给予高脂饲料喂养,可观察到大鼠体重仍有增长,但增长速度小于前8周,表现出精神萎靡,反应迟钝,动作迟缓。经针刺治疗3周后大鼠精神萎靡,反应迟钝,动作迟缓等较前有所好转,体重增长速度明显降低。2.2.2针刺对高脂血症大鼠动物粥样硬化指数(AI)及脂质代谢的影响在经高脂饲料喂养八周后,模型组及针刺组(未接受针刺干预前)脂质代谢已经出现紊乱,与空白组比较,模型组及针刺组(未接受针刺干预前)血清TG、TC、LDL-C水平都显著高于空白组(P<0.05-0.01),血清HDL-C水平显著低于空白组(P<0.01)；AI指数显著高于空白组(P<0.01)。这一结果提示,经高脂饲料喂养八周后,模型组和针刺组(未接受针刺干预前)动物脂质代谢紊乱程度及动脉硬化程度已经达到了高脂血症动物模型的要求。在经针刺干预治疗3周以后,模型组大鼠血清TG、TC、LDL-C水平显著都高于空白组(P<0.05-0.01),血清HDL-C水平显著低于空白组(P<0.01),AI指数显著高于空白组(P<0.01)；针刺组在经针刺干预三周后,针刺组大鼠血清TC、TC、LDL-C水平显著都低于模型组(P<0.05-0.01),血清HDL-C水平显著高于模型组(P<0.05),AI指数显著低于模型组(P<0.01)。2.2.3针刺对高脂血症大鼠肝脏形态学的影响空白对照组：肝小叶结构清晰,中央静脉居中,界面平滑,肝索排列规则,向四周呈放射状排列；窦内皮细胞、储脂细胞及枯否氏细胞未见增生。肝细胞胞浆红染,核居中。汇管区结构清晰,胆管未见破坏,纤维结缔组织未见增生,未见脂肪变性及肝内炎症现象(见附录3图1)。模型组：可见弥漫性肝细胞脂肪变性,以小空泡脂肪变为主,肝小叶内有炎细胞浸润,但未见肝纤维化。脂变肝细胞极度肿胀成圆形,体积较正常明显增加,胞质内充满大量脂肪空泡(见附录3图2)。针刺组：可见散在肝细胞脂肪变性,以小空泡脂肪变为主,肝小叶内少许炎细胞浸润(见附录3图3)。2.2.4针刺对高脂血症大鼠血液流变学的影响高脂血症模型大鼠血液呈高黏高凝状态：血液黏滞度增高,血细胞聚集性增强在经针刺干预治疗3周后,与空白组比较,模型组的高切变率、低切变率、血浆比粘度、红细胞压积、红细胞电泳时间、红细胞聚集指数都显著高于空白组(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,针刺组的高切变率、红细胞压积、红细胞电泳时间、红细胞聚集指数都显著下降(P<0.05或P<0.01)。2.2.5针刺对高脂血症大鼠氧自由基的影响血脂升高时,脂质过氧化作用增强,丙二醛(MDA)产生增多,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)降低。在经针刺干预治疗3周后,与空白组比较,模型组血清SOD、GSH-Px水平均显著低于空白组(P<0.05或P<0.01),血清MDA水平显著高于模型组(P<0.01)。与模型组比较,针刺组血清GSH-Px水平显著高于模型组(P<0.05),血清MDA水平显著低于模型组(P<0.01)。2.2.6针刺对高脂血症大鼠血清—氧化氮(NO)及血浆内皮素(ET)的影响高脂血症可造成动脉内皮功能损害,引起内皮细胞功能障碍,或血管壁功能和结构的损伤,从而影响血管功能,而ET、NO在血管收缩及舒张中有重要作用。在经针刺干预治疗3周后,与空白组比较,模型组血清NO水平显著低于空白组(P＜0.05),模型组血浆ET水平显著高于空白组(P<0.05或P<0.01)；与模型组比较,针刺组血清NO水平显著高于模型组(P<0.05),针刺组血浆ET水平显著低于模型组(P<0.05)。3.结论高脂饮食可成功复制出高脂血症大鼠模型,该模型能够表现出高脂血症所应具备的基本特征：血脂升高、脂肪肝、动脉粥样硬化、向心性肥胖等。经本研究证实,本模型大鼠血管内皮功能有明显的受损表现,为本研究的顺利开展打下良好的基础。针刺干预可显著改善高脂血症模型的脂质代谢紊乱：降低高脂血症大鼠血脂、动脉粥样硬化指数、改善脂肪肝,与模型组对比,差异显著。针刺可干预治疗高脂血症,其机制可能与其降低血脂、改善动脉粥样硬化指数、调节失衡的体内氧化-抗氧化系统、改善血液流变学、改善氧自由基功能、改善脂肪肝有关。