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APE1是一种多功能蛋白酶，具有DNA碱基切除修复、氧化还原生物等功能，是大分子功能复合体的一个范例。它在DNA损伤修复和氧化还原信号调控等多个重要的生物学过程中发挥着主要作用。APE1在大多数恶性肿瘤中高表达或胞浆异位表达，被认为是恶性肿瘤的重要标志物。抑制APE1可显著杀伤肿瘤细胞，同时极大地提高细胞对DNA损伤的敏感性。因此，APE1极有可能是增强肿瘤细胞对化疗敏感性的有效作用靶点。最新研究发现，APE1氧化还原抑制剂可以被用作一个药物单独使用，也可作为一种具有潜在抗增殖或细胞毒性药物与现有治疗手段联合使用，具有重要的临床转化应用价值。已发现大量的APE1小分子抑制剂，但这些化合物的研究都处于初级阶段。本研究通过对中药天然小分子化合物库进行虚拟筛选并结合体外活性筛选，以其获得APE1特异的小分子抑制剂，为以APE1为靶点的分子靶向治疗提供实验基础。目的：筛选鉴定APE1的特异性小分子抑制剂，并研究其抗肿瘤活性。方法：1.基于APE1蛋白结构，运用计算机虚拟筛选从中药天然小分子化合物库中发掘APE1的候选小分子抑制剂；2.通过电泳迁移率实验对98种小分子化合物分子进行活性筛选及鉴定；3. AP内切酶实验鉴定候选化合物对APE1损伤修复的抑制作用；4.双偏振极化干涉分析系统检测APE1与候选抑制剂的相互作用；5. CCK-8、荷瘤裸鼠实验研究棉酚抗肿瘤及协同顺铂化疗作用。结果：1.通过虚拟筛选，发现61个对APE1功能具有潜在抑制活性的小分子化和物，其中5个针对APE1的损伤修复功能，56个针对氧化还原功能。2.通过电泳迁移率实验、AP内切酶实验、双偏振极化干涉分析，发现丹参酮ⅡA、棉酚、依布硒通过与APE1直接相互作用显著抑制其氧化还原功能，其中棉酚还可显著抑制APE1修复功能。3.体内外实验表明棉酚可显著抑制宫颈癌肿瘤生长并可增强顺铂化疗敏感性。结论：1.丹参酮ⅡA和依布硒是APE1的氧化还原功能特异性小分子抑制剂。2.棉酚为APE1氧化还原和损伤修复双功能抑制剂，棉酚可通过抑制APE1抑活性制肿瘤细胞生长，增强顺铂化疗敏感性。