论文部分内容阅读
囊性纤维化跨膜传导调节因子（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, CFTR）是膜氯离子通道蛋白中的一种,具有磷酸依赖性,属ATP结合蛋白—ABC超家族中的一种。CFTR氯离子通道在跨上皮离子运输等多种生理活动中起着重要作用。CFTR突变使CFTR氯离子通道不能行驶正常的离子转运功能,可引起一系列疾病,囊性纤维化（CF）主要就是由CFTR突变引起的。CF病变影响多种上皮组织和器官的正常功能。CF在体内的研究目前还没有找到理想的动物模型,基因打靶技术进行基因的定点敲除（无蛋白产物表达）或定点突变（表达致病性突变蛋白）仅限于在小鼠体内应用,基因打靶在大动物体内进行的尝试尚无成功报道。已建立的小鼠CF模型在呼吸道下腺的分布上与人存在很大差异,致使小鼠模型不能准确的表现出CF患者的肺部病变特征。所以需要建立一个能更好地模拟人CF病理表现的大动物CF病理模型。另一可行性策略为利用抑制剂诱导出CFTR“功能敲除”引起的CF组织病理模型,即大动物体内的CFTR氯离子通道功能被具有特异性、高亲和力的CFTR抑制剂持续的抑制。利用此种方法诱导的病理变化的优点是,具有可控性和可逆性,与基因敲除病理模型的不确定性相比,更有利于功能性的生理和病理研究。CFTR抑制剂将在建立CF大动物模型方面发挥重要作用。本课题组利用高通量筛选技术（HTS）从小分子化合物库中筛选出一种具有高亲和力的、全新的、猪的特异性CFTR小分子抑制剂pCFTRinh-A。现有实验已经证明,pCFTRinh-A在体外能够抑制所有已知激活剂对CFTR氯离子通道的激活作用。由于小鼠生理病理模型较之猪等大型动物更容易建立,且小鼠取材容易,故将pCFTRinh-A首先在小鼠体内进行药代动力学和组织分布考察,为建立大动物猪的CF病理模型提供依据,从而对研究CF发病根源及寻找有效的治疗途径具有极其重要的意义。pCFTRinh-A是猪CFTR特异的小分子抑制剂。为研究其在小鼠体内的药代动力学及组织分布,按20 mg·kg?1剂量,经腹腔注射给药,采用HPLC方法测定生物样品中pCFTRinh-A的浓度。结果显示:小鼠腹腔注射pCFTRinh-A后5 min即可测到药物存在,15 min左右血药浓度达峰值;药动学特征表现为:pCFTRinh-A在小鼠体内吸收分布迅速,达峰时间快,消除缓慢。pCFTRinh-A在小鼠体内分布具有一定组织分布特异性,主要分布于肝、肾、肺组织,其次为脾、心组织,肠组织中分布很少,脑组织中分布最少。pCFTRinh-A在小鼠体内的药代动力学和组织分布特异性为建立猪等大动物CF模型提供依据,从而为研究CF发病机理及寻找有效的治疗途径奠定基础。