神经系统、内分泌系统和免疫系统是机体三大调节系统，三者之间存在着复杂的相互依赖和相互制约关系。脑有免疫系统，但脑仍为免疫相对豁免器官，血携免疫信息从何位点以及如何入脑，仍是一个未决的问题。室周器官（circumventricular organs，CVOs）是第三、四脑室周围的一系列微小器官，主要包括终板血管器、穹隆下器、连合下器、正中隆起、垂体后叶、最后区、脉络丛等，它们缺乏血脑屏障，血管内皮细胞均缺乏紧密连接结构，有些血管为窗性毛细血管，其功能多达十余种。以往的研究侧重于CVOs在神经内分泌调节中的作用，而在神经免疫调节回路上的作用只是在20世纪90年代以后才被重视。Broadwell等（1992）提出脑开窗（windows of the brain）的概念，并认为CVOs是脑屏障上的漏点（leaky points），但是脑内环境并未因脑开窗存在而改变。Quan等发现腹腔注射细菌脂多糖（LPS）后，血脑屏障细胞可合成免疫信号分子，从而激活CNS内部细胞，而脑脊液看来是这些免疫信号传导的一种水道。一些研究指出免疫信息可通过三种途径入脑：血脑屏障（blood-brain barrier，BBB），CVOs和迷走神经传入纤维。然而，脑外部的免疫信息如何经CVOs入脑，以及脑开窗和BBB共存有何意义仍不清楚。由此，我室对CVOs的神经免疫调节功能进行了系列研究，并认为CVOs可能是血携免疫信息分子少量、优先入脑的位点。CVOs缺乏血脑屏障，血携免疫信息分子可能首先由此入脑，使脑在大量免疫信息入脑前处于预应激状态，以便及时调节全身各系统功能状态。CVOs仅占脑重的0.2%，血携免疫信息分子只能少量由此入脑，不会导致脑内免疫状态的明显波动。实验性变态反应性脑脊髓炎（experimental allergic encephalomyelitis，EAE）是由针对自身髓鞘特异性T淋巴细胞<WP=5>介导的、以中枢神经系统血管周围单核细胞浸润和白质脱髓鞘等为特征的自身免疫性疾病，是人类多发性硬化的动物模型。虽然其发病机理尚不完全明了，但是普遍认为EAE的发病是由于外周髓鞘某些组分抗原激活免疫反应，辅助T淋巴细胞-1(helper T lymphocyte-1，Th1)细胞增殖、分化，并产生大量炎性因子，进一步由外周血携带这些免疫信息物质入脑，导致脑损伤，并出现特定的临床症状。我们首次观察到EAE时CVOs出现显著病理改变，并随病情的恢复，其病理损伤亦逐渐恢复正常，但如何在EAE模型中证实我们对CVOs的假说，尚需提供更多的证据。近年研究发现，氧化应激在EAE发病中起着重要作用，血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）能催化血红素分解为一氧化碳（carbon monoxide，CO）、胆绿素和Fe2+。CO除了具有神经递质的作用外，还能显著拮抗NO的神经毒性；胆绿素以及随后的产物胆红素具有比Vitamin C、Vitamin E更强大的抗氧化作用，能保护细胞免受氧化损伤。但是HO-1系统在EAE发病中的作用，及CVOs的病理改变是否与HO-1蛋白或基因表达相一致，值得进一步探讨。对于CVOs的研究发现，它们是作为一个集体发挥生理和病理作用的，因此本研究以穹隆下器（subfornical organ，SFO）作为CVOs的代表进行研究。在HO-1系统的信号转导方面研究颇多，由于HO-1基因中含有 核因子-(B （nuclear factor-kappa Balpha，NF-(B）结合位点，所以NF-(B备受关注。研究认为，EAE时NF-(B蛋白的表达水平升高，但是EAE时NF-(B与HO-1之间的相互关系、二者在SFO如何表达均不清楚。本研究以EAE作为中枢神经系统免疫病理变化的条件，从下述四个方面求证我们的假说：1.在EAE大鼠发病时SFO的形态学动态变化。2. EAE时HO-1基因和蛋白在脑和SFO表达的动态变化。3.脑组织核因子-??激活对EAE的作用研究。4.EAE大鼠SFO及脑组织NF-(B、HO-1基因和蛋白表达的相关性研究。1 在EAE大鼠发病时SFO的形态学动态变化 ⑴ EAE大鼠模型的建立 <WP=6>40只Wistar雌性成年大鼠随机分为三组：EAE诱导组（CFA+GPSCH）、完全福氏佐剂（CFA）组、生理盐水（NS）组。结果显示：① 一般情况：在免疫诱导后７d即开始发病，如尾部和下肢瘫痪等；14 d达高峰，体重平均减轻37.50±32.98 g；诱导后21 d左右症状基本消失，总发病率90%，平均发病时间为12.22+3.31 d，发病程度为2.4+1.26分。在整个发病过程中，死亡率为零。CFA组及NS对照组，接种后动物体重持续上升，一般情况无明显变化，同正常动物。② 病理改变：EAE大鼠脊髓内遍布“袖套样”炎性细胞浸润，以灰白质交界区更多，浸润的细胞类型以小圆的淋巴样细胞为主，未见嗜中性粒细胞浸润，可见“噬神经元”现象和髓鞘崩解。EAE大鼠全脑均可受累，病灶主要分布于脑室周围的白质和灰白质交界处，SFO脑室面的室管膜细胞破裂缺损；其室管膜下层可见增生的胶质样细胞，有向室管膜面游走的趋势。以上结果显示：EAE大鼠的病程、临床表现和病理改变均很典型，说明动物敏感，模型建立成功，并首次在透射电镜下观察到EAE时SFO出现病理损伤。⑵ EAE大鼠SFO室管膜细胞的形态学改变 应用光镜、扫描电镜（SEM）和透射电镜（TEM）方法，动态观察EAE发病的潜伏期（7 d）、发病期（14 d）、恢复期（21 d）SFO室管膜细胞的形态学改变。结果：① 在EAE潜伏期，未见EAE