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禽腺病毒是腺病毒科的成员,在世界范围内分布广泛,急性感染后主要表现包涵体肝炎、心包积液肝炎综合征为主。自2013年以来,心包积液肝炎综合征在我国山东、河北、陕西、河南、江苏等地区大面积流行,给我国的养禽业造成了不小的经济损失。本研究从山东泰安某鸡场采集心包积液肝炎综合征的疑似病例肝脏组织,经SPF鸡胚传代培养将病毒分离。根据Gen Bank中已经公布的FAdV-4的Hexon基因序列设计一对特异性的引物序列,分离病毒PCR验证为阳性,经测序后序列比对证明,分离病毒为血清4型禽腺病毒。将分离到的病毒浓缩后作为琼脂扩散试验的抗原与特异的阳性血清反应,结果发现抗原孔与血清孔之间出现明显的沉淀线;经动物回归试验,复制出了该病典型的临床症状,将肝脏进行病理学切片和电镜观察后,发现典型的肝细胞内包涵体,细胞核肿胀变性,胞内充满病毒粒子;血凝试验表明,该病毒无血凝活性;将PCR扩增产物与表达载体pET-28a连接,转化至感受态细胞中,经IPTG诱导,重组蛋白的到了良好表达,SDSPAGE电泳证明,表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中。对重组蛋白进行纯化后,蛋白浓度为4.1 mg/m L。经Western-blot分析表明,纯化后的重组蛋白具有较好的反应原性,可将其作为间接ELISA的包被抗原。将Hexon重组蛋白作为包被抗原,建立了检测FAdV-4抗体的间接ELISA检测方法。试验结果表明,该ELISA检测方法具有较好的特异性、重复性和敏感性。用该方法检测临床样本100份,阳性率为25%。以上研究结果表明,本研究建立了检测FAdV-4抗体的Hexon蛋白间接ELISA方法,为本病的预防、诊断和治疗提供了技术参考。