川芎嗪对H22肝癌小鼠血管生成及KLF4/VEGF/ADAMTS1的通路影响

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目的:研究川芎嗪(TMP)对H22肝癌小鼠血管生成的影响以及血管生成相关蛋白的表达变化。方法:H22肝癌小鼠随机分为四组:模型组(生理盐水)、阿霉素对照组(DOX 2mg·kg-1)、川芎嗪低、高剂量组(TMP 25,50mg·kg-1),腹腔注射给药。实验结束时采血,检测血清转氨酶ALT、AST水平;摘取H22肝癌小鼠腋下瘤并称重,计算肿瘤抑瘤率;用HE染色观察H22肝癌小鼠肿瘤组织的病理形态学变化;CD34免疫组织化学染色观察肿瘤组织的血管生成;Western Blot检测H22肝癌小鼠肿瘤组织中Kruppel-like因子4(KLF4)、血管内皮生长因子(VEGF)、人金属肽酶含血小板反应蛋白1(ADAMTS1)的表达变化。结果:1.H22肝癌小鼠腋下瘤的表面观。与模型组相比较,川芎嗪低、高剂量组腋下瘤明显变小,阿霉素对照组与川芎嗪高剂量组差异无统计学意义。2.川芎嗪低、高剂量组的瘤重和抑瘤率与模型组相比显著降低,在川芎嗪高剂量组和阿霉素对照组之间两者差异无统计学意义。低、高剂量TMP的抑瘤率分别为31.6%和53.53%。3.血清ALT、AST结果显示,与模型组相比较,血清水平ALT、AST显著降低,阿霉素对照组血清ALT、AST增加。表明TMP对肝癌小鼠血清ALT、AST的升高有显著抑制作用,能改善肝癌小鼠的肝功能。4.HE染色结果显示,模型组肿瘤组织呈典型柱状、腺管样癌巢结构,肝癌细胞排列成索状、团块状,并向周围肝组织浸润,部分区域有严重坏死、出血,癌巢周围肝细胞异型性明显,同时伴有大量炎性细胞浸润。川芎嗪低、高剂量组能够减少癌巢数量,肿瘤组织中出现大片空泡坏死区。川芎嗪高剂量组与阿霉素对照组之间没有显著性差异。5.免疫组化结果显示,模型组CD34阳性表达率高,可见大量的微血管生成,川芎嗪低、高剂量组随着剂量的增加,血管生成逐渐减少,川芎嗪高剂量组与阿霉素对照组抑制血管效果差异无统计学意义,表明不同浓度的TMP可不同程度的抑制肝癌小鼠肿瘤组织微血管的生成。6.Western Blot结果显示,与模型组相比,川芎嗪低、高剂量组显著抑制VEGF的蛋白表达,同时升高KLF4和ADAMTS1的蛋白表达。结论:川芎嗪对H22肝癌小鼠的肿瘤生长具有一定的抑制作用,该作用与其下调VEGF蛋白表达,上调KLF4、ADAMTS1的蛋白表达,进而抑制肿瘤血管生成有关。
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