转基因修饰猪可以用于改良物种，促进畜牧业发展，也可以作为器官移植中的低免疫原性供体，因此在医药学及畜牧业等领域拥有巨大的应用潜力。传统的基因打靶效率非常低。新兴技术锌指核酸酶(Zinc-finger nuclease，ZFN)能够有效的介导基因的定点修饰，效率高达1％，这有望从根本上解决体细胞基因组定点修饰效率低的问题。　　本研究主要是通过锌指核酸酶技术高效建立了肌肉抑制素基因（Myostatin）和α-1，3-半乳糖苷转移酶(α-1，3-galactosyl-transferase，GGTA1)基因双等位基因敲除细胞系，比传统的基因打靶效率提高了10000倍。同时，结合体细胞核移植技术产生了Myostatin和GGTA1双等位基因敲除的转基因克隆猪，为建立瘦肉型猪的新品系，以及为猪-人的异种器官移植打下理论基础。实验结果如下:　　1.产生Myostatin基因敲除的克隆猪。将特异性识别Myostatin的锌指核酸酶转入大白猪的成纤维细胞LW5中，药杀筛选后，得到10个单敲细胞系，2个双敲细胞系，在细胞水平的打靶效率分别为11.6％，2.3％.以两个双等位基因敲除的细胞系M11，M100为核供体进行核移植，产生8头转基因克隆猪。　　2.产生GGTA1基因敲除的克隆猪。将特异性识别GGTA1的锌指核酸酶转入大白猪的成纤维细胞系LW5中，加药筛选后，产生了18个单敲细胞系，4个双敲的细胞系，细胞水平的打靶效率分别为23.4％，5.2％.以双等位基因敲除的细胞系G3，G56，G65为核供体，通过体细胞核移植技术产生了3头转基因克隆猪，同时还建立了1个源自GGTA1基因敲除克隆猪的胚胎成纤维细胞系。在GGTA1基因敲除的细胞表面不存在Gal抗原表位，这些细胞与人的血清共孵育时，能够免受人类补体系统的攻击。