荧光量子点提高多轮基因扩增效率的研究及机理探讨

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ty532215014
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本课题通过将纳米材料量子点与多轮基因扩增结合,以此来达到提高多轮扩增轮数,以及扩增特异性的效果。量子点在高保真的Pfu DNA聚合酶所催化的PCR体系中下可以产生明显的热启动效果,并且在50℃温浴1h的情况下依然能产生清晰的目的条带。在本课题中首先选用3种不同来源的模板以及不同GC含量的引物进行基于量子点的多轮基因扩增,探究扩增特异性的影响因素。在以海洋污损生物藤壶M8模板的多轮扩增实验中,量子点在实验中的使用使得扩增轮数从3轮有效扩增提高到了8轮,通过对比相同扩增条件下的常规多轮基因扩增以及基于纳米金的多轮基因扩增方法的扩增效果,进一步验证了量子点对多轮基因扩增特异性的提高具有显著的效果。通过对比量子点作用下的不同模板,低浓度模板的多轮基因扩增效果,以及不同表面修饰的量子点对多轮基因扩增效果的影响,量子点均表现出了稳定且优异的增效作用,在这基础上通过将扩增产物测序结果比对,显示出了量子点所作用的多轮基因扩增具有高度的忠实性,这对能否作为实际应用具有重要的意义。  量子点在由高保真Pfu DNA聚合酶所催化的多轮基因扩增中能产生明显的热启动效果,而在普通的Taq聚合酶催化的扩增体系中却没有显著的差别,因此,量子点与Pfu DNA聚合酶之间的相互作用作为主要的机理研究对象。利用琼脂糖凝胶电泳技术初步检测发现PCR体系中的各个组分均能够与量子点产生一定的作用,但量子点与Pfu DNA聚合酶的之间的影响最大,之后采用紫外可见分光光谱法以及傅里叶红外光谱法进行深入研究分析更加证实了量子点与Pfu DNA聚合酶之间的相互作用。
其他文献
粮食工作联系着粮食生产领域和粮食消费领域两个千家万户,常年面向社会、面向群众。就粮食系统内部而言,购销调存加、工商议购附互相联系、互相渗透,整天与钱、粮、人、物打交道
The Sebastes schlegelii is distributed along the coast of Japan, Korea and China. It is well established that rock fish Sebastes schegelii is dominant for coast
花宝沟煤矿认真贯彻国务院《关于落实科学发展观加强环境保护的决定》,认真落实山西省环境保护会议暨蓝天碧水工程启动大会精神,积极响应长治市全民共创“国家园林城市、国家卫
生物体内普遍存在的多胺转运系统PotABCD运载体由四个功能蛋白组成:PotA是三磷酸腺苷酶,为转运系统提供能量;PotB和PotC可在双层膜上形成转运通道;PotD是一种胞质结合蛋白,有一个
英子总是藏着舌头讲话,还不到12岁,一对胸就显了出来,兜在路边摊买来的卡通T恤里,鼓胀着等着男同学发笑.就连小她三个年级的弟弟英俊也是,尽管他总是比她更惹眼,隔三岔五就给
期刊
人类有了战争,便有了军队; 世界有了军队,便有了军乐。 两军厮杀的战场,军乐可以鼓士气,壮军威。 盛大的国家庆典,军乐可以兴礼仪,振国威。 这就是军乐产生的原由,也是军乐
一、几组数据的启示下列三组数据,是从我校工商管理系统计出来的。(l)1995年上学期,全系有普通高等教育学生696人,研究生57人,41.5%的学生参加了党章学习小组,其中43.5%的学生参加了学校
本文通过对荣华二采区10
期刊
随着世界经济的飞速发展和科学技术的不断创新,企业面临着越来越严峻的考验,如何降低生产成本,提高生产效率,已经成为各企业至关重要的问题。制造业自动化在制造业转型中的应
在全球气候变化的背景下,自然灾害对人类生存和社会经济发展造成了严重威胁。社会脆弱性反映了区域社会系统在面对自然灾害时可能遭受的损害程度。中国国土面积广阔,地理气候条