论文部分内容阅读
水溶性共轭聚合物具有强的光捕获能力和分子线效应,在生物检测、疾病诊断、药物运输和释放、细胞成像、微生物及肿瘤杀伤等领域展现出广泛的应用前景。本文分别以水溶性聚芴衍生物PFP和寡聚对苯撑乙炔OPE为光学平台,发展了两种荧光分析方法,分别用于α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选和病原菌的抗菌调控,具体内容如下:一、基于共轭聚合物PFP的α-葡萄糖苷酶抑制剂(α-GIs)的灵敏筛选设计了一种基于水溶性共轭聚合物PFP的荧光传感新方法,实现了α—GI的灵敏快速检测。在pH7.4水溶液中,当α-葡萄糖苷酶的底物对硝基苯基-α-D-吡喃半乳糖苷(PNPG)被α-葡萄糖苷酶水解后,释放出带负电荷的对硝基苯酚淬灭剂,当对硝基苯酚与带正电荷的PFP通过静电作用相互接近时,PFP的荧光被有效淬灭;在α—葡萄糖苷酶抑制齐(α-GIs)存在下,PNPG的水解被抑制,从而PFP的荧光表现“开”的状态。通过检测PFP的荧光淬灭与增强,可以简单灵敏地筛选α-GIs。该传感体系利用阳离子共轭聚合物PFP信号放大的优点提高了检测的灵敏度,测得的抑制剂的IC50比用紫外分光光度法测得的值低。在所测定的三种抑制剂2,4,6-三硝基苯酚、3-丁烯基酞内酯和阿卡波糖中,2,4,6-三硝基苯酚存在下,PFP的荧光“开”最明显,表明2,4,6-三硝基苯酚在选择测定的三种抑制剂中抑制效果最好。这一测定结果与文献报道的三种抑制剂的抑制效果相一致;2,4,6-三硝基苯酚和3-丁烯基酞内酯的IC50分别为0.037mM和0.21mM,比用分光光度法测定报道的值(60.3μM和2.35mM)要小。另外,利用该方法,我们还发现了一种新的a-葡萄糖苷酶抑制剂3-正丙基茚苯酞,其表现出与3-丁烯基酞内酯相似的抑制作用(3-正丙基茚苯酞的IC50为0.35mM)。因此,利用PFP的光学信号放大作用建立的新型灵敏传感体系成功地实现了α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选。该方法因其简便灵敏,有望用于筛选和测定其它水解产物是对硝基苯酚的酶及其抑制剂。二、荧光DNA—寡聚苯撑乙炔水凝胶的合成及在杀菌调控方面的应用设计合成了一种新型荧光DNA—寡聚苯撑乙炔水凝胶,并研究了其在杀菌调控方面的应用。我们合成的水凝胶通过扫描电子显微镜及荧光显微镜进行了表征。在水凝胶中,共轭寡聚物作为光敏剂并保留了其光学性质,鲑鱼精DNA作为水凝胶的框架并保留了其生物相容性。当对水凝胶和大肠杆菌的混合物进行光照时,单线态氧释放到体系中,但是,由于带负电荷的细菌与带负电荷的水凝胶(水凝胶的正负电荷比为1:90)因静电排斥无法接近,共轭聚合物产生的单线态氧无法杀死细菌,因此,在水凝胶状态下,水凝胶表现为无抗菌活性。当需要启动水凝胶的杀菌活性时,在水凝胶中加入脱氧核糖核苷酸酶DNase,水凝胶被水解为寡聚物和DNA片段甚至单个核酸苷,处于游离状态的寡聚物能够透过细胞膜进入细菌内,光照条件下产生单线态氧进而杀死细菌。这样就可以利用DNase调控寡聚物的杀菌活性。而且,这种新型材料及调控机制为发展药物释放新方法提供了新思路。