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研究目的研究Galectin-3(GAL-3)在胰腺星状细胞促进胰腺癌细胞增殖和浸润过程中的作用,以及对胰腺癌新生血管形成的促进作用,旨在部分阐明Galectin-3在胰腺癌进展中的作用,以及胰腺星状细胞对胰腺癌的作用机制,并为胰腺癌的治疗提供新的靶点。研究方法1.体外培养人胰腺癌细胞株SW1990和人脐静脉内皮细胞(human umbilical endothelial cells, HUVECs),原代分离并培养人胰腺星状细胞(human Pancreatic stellate cells, PSCs)。收集SW1990细胞和PSCs的上清液。2. ELISA、RT-PCR和western blot检测PSCs和SW1990细胞Galectin-3的表达情况。3. MTT和流式细胞仪研究GAL-3、SW1990细胞上清液等对PSCs的增殖的影响。4.四唑氮蓝还原法(MTT)和流式细胞仪、裸鼠移植瘤模型等方法研究GAL-3抗体、PSCs上清液等对SW1990细胞体内外增殖的影响。5.体外侵袭试剂盒和鸡胚尿囊膜试验检测PSCs上清液和GAL-3抗体对SW1990细胞体内外浸润的影响。6. MTT和流式细胞仪检测GAL-3以及SW1990细胞上清液对HUVECs增殖的影响。小管形成试验观察GAL-3以及SW1990上清液对体外新生血管形成的影响。研究结果1. SW1990细胞不仅表达GAL-3,而且能向细胞外分泌GAL-3蛋白。在PSCs上清液的诱导下,SW1990细胞GAL-3的表达增强。PSCs不表达GAL-3。2. GAL-3蛋白能促进PSCs的增殖,SW1990上清液也促进PSCs的增殖,在SW1990上清液中加入GAL-3抗体后,这种促进作用被部分抑制。3. GAL-3抗体能抑制SW1990细胞增殖,PSCs上清液能促进SW1990细胞的增殖,在PSCs上清液中加入GAL-3抗体后,这种促进作用被部分抑制。4. GAL-3抗体能抑制SW1990细胞的浸润,PSCs上清液能促进SW1990细胞的浸润,在PSCs上清液中加入GAL-3抗体后,这种促进作用被部分抑制。5. GAL-3蛋白能促进HUVECs的增殖和体外新生血管的形成;SW1990细胞上清液也能促进HUVECs的增殖和体外新生血管的形成,在SW1990细胞上清液中加入GAL-3抗体后,其促进作用被部分抑制。主要结论及意义1. GAL-3在胰腺癌的发生发展中起着重要的作用。2.胰腺癌细胞可能通过GAL-3促进PSCs的增殖,PSCs能上调胰腺癌细胞GAL-3的表达。PSCs能促进胰腺癌的增殖和浸润,而且其促进作用和肿瘤细胞表达的GAL-3相关,即PSCs和胰腺癌细胞通过GAL-3的作用,形成恶性循环。胰腺癌细胞和PSCs之间的这种恶性循环是促进胰腺癌的进展恶化、导致胰腺癌预后不良的重要原因。3.胰腺癌细胞能通过GAL-3促进新生血管形成。4. GAL-3可以成为胰腺癌治疗的新靶点。5.抑制PSCs的活化和增殖是否可以抑制胰腺癌的发生进展,需要进一步的研究。