三种全麻药物对大鼠脑内内源性硫化氢及CBS活性的影响

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全麻药物的作用机理一直以来是人们研究的重点。气体信号分子在麻醉过程中发挥着重要作用,广泛参与机体的麻醉过程。硫化氢作为一种新型气体信号分子,CBS是中枢神经系统中产生它的唯一酶,尚不知晓其是否参与机体的麻醉过程。本实验主要是研究选取的三种典型全麻药对大鼠中枢神经系统内源性H2S及CBS活性的影响,借此探讨内源性H2S及CBS与麻醉之间的关系。本实验将240只健康Wistar大鼠,随机分为对照组(CG)、异氟醚组(IG)、氯胺酮组(KG)和舒泰组(ZG),除CG外,IG、KG、ZG又分为三个亚组:即麻醉组、苏醒I组和苏醒II组。CG注射生理盐水,IG吸入异氟醚,KG腹腔注射氯胺酮,ZG腹腔注射舒泰。规定时间点对大鼠断头取脑,依次分离海马、脑干、丘脑、大脑皮层和小脑五个脑区,测定各个脑区中H2S含量、CBS表达区域及其蛋白表达。实验结果表明(1)通过亚甲基蓝染色法发现,海马、脑干和大脑皮层内H2S含量在麻醉组、苏醒Ⅰ组和苏醒Ⅱ组中均呈先降低后升高,最后恢复正常的趋势(P<0.05)。而小脑和丘脑内H2S含量变化不显著(P>0.05)。(2)通过免疫组化染色观察,CBS在大鼠各个脑区神经细胞内均可表达,其中在海马内的表达呈区域性,主要分布在CA1区;而在其他四个脑区呈现分散表达。(3)通过蛋白免疫印迹实验发现,在麻醉过程中海马和脑干内CBS蛋白表达量呈显著降低趋势,到苏醒期逐渐恢复至正常水平(P<0.05);大鼠大脑皮层内CBS蛋白表达量因麻醉药的不同而有所差异;丘脑和小脑内CBS表达量无显著差异(P>0.05)。综合实验结果表明:三种全麻药在麻醉过程中脑内H2S和CBS含量的变化与大鼠的行为学变化相一致,表明全麻药作用机理与脑内H2S和CBS含量可能存在一定的相关性,即H2S和CBS可能参与了机体对全麻药在脑内相关活动的调控。
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