【摘 要】
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人类凋亡相关基因PDCD5是我室1999年克隆的与凋亡相关的新基因,功能、定位研究表明,PDCD5蛋白定位于细胞核内并能促进某些肿瘤细胞的凋亡,结构预测显示:PDCD5蛋白与DNA能有一
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人类凋亡相关基因PDCD5是我室1999年克隆的与凋亡相关的新基因,功能、定位研究表明,PDCD5蛋白定位于细胞核内并能促进某些肿瘤细胞的凋亡,结构预测显示:PDCD5蛋白与DNA能有一定程度的结合.为了进一步的功能研究,我室表达、纯化了大量的PDCD5重组蛋白,为了检测PDCD5重组蛋白的纯度、相对分子质量、随温室时间变化的稳定性及同DNA结合的情况,我们采用了毛细管区带电泳(capillary zone electrophoresis,CZE)、毛细管凝胶电泳(capillary gel electroresis,CGE)和亲和毛细管电泳(affinity capillary electrophoresis,ACE)技术,实验表明,经过电泳条件的优化,我室表达、纯化的PDCD5重组蛋白的在毛细管电泳图谱上呈现单一峰,相对分子质量为15800;在37℃条件下放置12小时、25℃24小时、4℃1周时有多组散碎峰出现;PDCD5与DNA结合后迁移时间后移.通过Karat3.2软件分析,上述结果提示;所表达的PDCD5重组蛋白纯度达到100﹪,在纯度方面能够满足功能实验的要求;PDCD5蛋白对热敏感并随着时间的延长呈现降解趋势;并且它还能和DNA有一定程度的结合.
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