桉树已经被作为一种速生树种得到集约化的栽培，其内生真菌遗传转化系统的建立对于桉树分子生物学研究及其经济价值的开发利用有重要意义，但目前这方面的研究工作国内外均报道不多。本实验选用桉树内生真菌作为研究对象，建立了其原生质体的遗传转化系统。实验主要涉及以下几方面的工作：1)三磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)在香菇中呈组成型强表达，我们用PCR扩增法从香菇基因组DNA分离得到GPD基因的启动子，并以此构建了以除草剂抗性为筛选标记的表达载体pL321b-ipt。在PEG介导下，将其导入桉树内生真菌原生质体，得到了具有除草剂抗性的转化子，从而证明了1.4kb GPD启动子在桉树内生真菌研究中的适用性，同时，为桉树的分子生物学研究提供了一种简便经济的遗传转化系统。2)异戊烯基转移酶(isopentenyl transferase，IPT)是细胞分裂素生物合成途径中的第一个限速酶，对细胞的生长发育有着重要的意义。IPT基因在桉树内生真菌中的表达目前还没有报道，于是我们构建了ipt表达载体希望从而达到促进植桉树生长的目的。3)本实验成功地分离了桉树内生真菌的原生质体并改进了原生质体的培养基，有效提高了原生质体的再生率、缩短了再生时间。在此基础上，我们利用电击法和PEG法将质粒pL321b-ipt导入原生质体，从而建立了桉树内生真菌遗传转化系统，为其分子生物学的研究奠定了基础。以上研究为桉树内生真菌基因组的人工修饰开辟了道路，对桉树基因工程的研究及开发利用具有重要意义。