威宁绵羊和贵州半细毛羊SOCS7、GFAP基因克隆、组织表达及可变剪接体分析

来源 :贵州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hongyan1230
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本试验以6月龄、1周岁和两周岁的威宁绵羊和贵州半细毛羊公母羊为研究对象,利用分子手段对威宁绵羊和贵州半细毛羊JAK/STAT信号转导通路相关基因(SOCS7和GFAP)编码区序列进行克隆,并进行生物信息学性分析。此外,本试验同时采用实时荧光定量PCR的手段对SOCS7和GFAP两个基因在威宁绵羊和贵州半细毛羊不同性别及不同生长阶段心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠及脑组织7个组织中mRNA水平上的表达规律进行探究,以期得到SOCS7和GFAP两个基因在威宁绵羊和贵州半细毛羊各组织内的表达规律。试验的主要研究结果如下:  (1)本试验成功克隆得到威宁绵羊和贵州半细毛羊SOCS7基因的CDS区全序列,并发现了的两种不同的可变剪接体,分别命名为 SOCS7-V1 和SOCS7-V2,进一步对序列进行比对发现两种可变剪接体CDS区长度的不同是由于发生剪接时绵羊SOCS7基因第五外显子和部分第六外显子是否保留所引起的。SOCS7-V1基因CDS区长度为1827bp,编码609个氨基酸,SOCS7-V2基因CDS区长度为1662bp,共编码554个氨基酸,SOCS7-V2相比于SOCS7-V1缺少165bp碱基对,55个氨基酸。通过进一步分析发现,不同的可变剪接体引起了最终翻译出蛋白质的等电点、分子质量、二级结构、三级结构的改变。  (2)本试验成功克隆得到威宁绵羊和贵州半细毛羊GFAP基因的CDS区全序列,威宁绵羊和贵州半细毛羊GFAP基因CDS区序列长度为1407bp,共编码469个氨基酸。  (3)通过对威宁绵羊和贵州半细毛羊的SOCS7基因两种可变剪接体在mRNA水平上的表达规律的探索发现,SOCS7基因两种可变剪接体在威宁绵羊及贵州半细毛羊中均有不同程度的表达,其中SOCS7基因两种可变剪接体在威宁绵羊和贵州半细毛羊中表达量总体规律几乎一致,即在脾脏内相对表达量最高,其次是肺脏、肾脏、心脏、肝脏和脑组织等组织,威宁绵羊和贵州半细毛羊SOCS7基因在不同性别、不同生长阶段相同组织中的表达具有一定的显著性差异,并且随着威宁绵羊和贵州半细毛羊年龄的增大,其SOCS7基因可变剪接体在组织中的相对表达量呈现小幅度上升的趋势。威宁绵羊和贵州半细毛羊公羊在脾脏、心脏、肺脏、肝脏和脑组织五个组织中SOCS7基因表达量都略低于母羊。  (4)通过对威宁绵羊和贵州半细毛羊的GFAP基因在mRNA水平上的表达规律的探索发现,GFAP基因在威宁绵羊及贵州半细毛羊中均有不同程度的表达,但是威宁绵羊和贵州半细毛羊GFAP基因仅在脑组织中相对表达量最高,其余组织中表达量极低。
其他文献
目的:对口腔溃疡开展口腔及饮食护理的临床效果进行探析.方法:将2016年3月—2017年3月在我院门诊治疗的94例口腔溃疡患者纳入观察研究中,通过数字表法分成观察组和对比组,各4
本试验选取450只27周龄体况良好、产蛋率相近的尼克珊瑚粉品种蛋鸡,采用单因子随机区组设计。试验分为5个处理,各处理分别饲喂基础日粮及在基础日粮中分别添加0.05%、0.1%、0
目的:探讨改进型无痛胃镜护理技术的临床应用效果.方法:从2016年10月至2017年4月在我院行电子胃镜检查的患者中抽取104例作为研究对象.随机分组:对照组52例,采用常规护理;观
目的:观察改良设计后的固定带在小儿NCPAP(经鼻持续呼吸道正压通气)管路固定中的临床应用效果.方法:随机将我科110例使用NCPAP的患儿分为观察组和对照组各55例,观察组使用改