拮抗酵母新种鉴定及其对柑橘果实采后主要病害的防治机理研究

来源 :西南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wukai110032
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
绿霉病和青霉病是采后柑橘果实最常见的侵染性病害,分别由指状青霉(Penicillium digitatum)和意大利青霉(Penicillium italicum)侵染所致,在生产中常使用化学杀菌剂控制病害的发生。但由于大量使用化学杀菌剂会危害人类健康、污染环境并使病原菌产生耐药性,生物防治逐渐受到广泛关注。利用拮抗酵母菌控制果实采后病害是一种有效的生物防治方式,但已知能防控柑橘采后病害的拮抗酵母菌种类较少且效果不佳。通常,不同种属的拮抗酵母菌生防机理差异较大,因而寻找新的优良拮抗酵母菌种并明确其生防机理对促进高效生防菌制剂的开发具有重要意义。此外,活菌制剂在生产和使用过程中遭受的逆境条件往往致使细胞内大量积累活性氧(Reactive oxygen species,ROS),进而诱导产生氧化胁迫,造成细胞的氧化损伤以及生活力、生防效力的下降。防控病害的效果不稳定已成为拮抗酵母菌在商业化应用中的主要障碍,因而通过增强拮抗酵母菌的氧化胁迫耐受性来提高其生防效力也是必要的。故本研究将形态、生理生化特征及分子系统学分析方法相结合对分离得到的拮抗酵母新种菌株FL01和FL02进行分类学鉴定,同时通过测定其细胞和胞外代谢产物的抑菌作用及其与果实的互作,探究新种菌株对柑橘青、绿霉病的生防机理,并与其他不同表型的优良拮抗酵母菌株进行对比。此外,采用脯氨酸处理提高新种菌株的抗氧化胁迫耐受性和生防效力,并对其可能涉及的机理进行探究。主要研究结果如下:(1)对菌株FL01和FL02的基因组DNA进行DNA-DNA杂交分析,结果显示两菌株相似性为82.2%,表明它们是同种的不同菌株。细胞呈球形、卵形、椭圆形,不形成假菌丝,能产生栗色色素(pulcherrimin)。该种菌株产生的厚垣孢子样“pulcherrima”细胞能分化形成子囊,破裂后释放出光滑的球状子囊孢子,孢子随即相互融合。采用26S rDNA的D1/D2区系统发育分析的方法对菌株FL01和FL02与其相似菌种的关系进行分析,发现该种菌株与亲缘关系最接近的Metschnikowia koreensis存在1.5%的碱基差异率,且在ITS区存在>100个碱基差异。此外,该种菌株的生理生化特征也与M.koreensis存在明显差异,包括发酵半乳糖,同化棉子糖、蜜二糖、L-鼠李糖、硝酸盐和亚硝酸盐的能力,在37℃和无维生素培养基中的生长能力,以及水解尿素的能力。因此,菌株FL01和FL02是归属于Metschnikowia的新种菌株,命名为桔梅奇酵母(Metschnikowia citriensis sp.nov.),并且将与相似种距离更小的菌株FL01~T指定为该新种的模式菌株。(2)在离体条件下对拮抗酵母新种菌株M.citriensis sp.nov.(FL01~T和FL02)的致病潜力进行评估,结果表明其相对安全。通过不同表型的优良拮抗酵母菌株的比较研究发现,M.citriensis sp.nov.(FL01~T和FL02)对柑橘青、绿霉病的生防机理与Candida oleophila FL14和Pseudozyma antarctica FL17差异较大。M.citriensis sp.nov.(FL01~T和FL02)的关键生防机制是对病原菌菌丝的附着并形成生物被膜,以及通过栗色色素的形成消耗病原菌生长所需铁离子。(3)脯氨酸可作为M.citriensis sp.nov.的细胞保护剂和生物被膜诱导剂。向M.citriensis sp.nov.(FL01~T)的培养基中添加1 mM脯氨酸能诱导菌株FL01~T形成更多栗色色素,该色素能直接减少胞内铁离子含量并间接降低胞内ROS水平,脯氨酸还能调节过氧化氢酶(Catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性,有效地抑制ROS和铁离子积累引起的细胞凋亡。此外,栗色色素的产生能促进菌株FL01~T生物被膜的形成。脯氨酸通过清除ROS并抑制细胞凋亡,增加色素产生以及促进生物被膜形成,使M.citriensis sp.nov.的氧化胁迫耐受性和生防效力提高。
其他文献
<正>随着科学技术发展及生活水平的提高,人们的着装观念也在发生变化。服装仅仅从款式造型上变化已无法满足人们对服装的新需求和渴望,无法满足人们体现自我个性的需要。因此
随着我国电气化铁路的高速发展,对铁路牵引供变电系统的运行安全可靠性要求越来越高。因而通过对电气化铁路牵引供变电系统进行深入的研究、分析及计算后,搭建一个铁路牵引供
成都目前的城市空间格局是在单中心基础上的圈层式布局。本文对成都地铁作了一个概述,并重点分析了地铁建设会对城市空间格局产生的影响,旨在说明地铁的开通会推动成都城市空
随着Internet技术发展迅猛,对其与之关联的Web应用程序的复杂程度提出了更高的要求。文章基于传统Web应用存在的缺陷,以及Ajax技术具备异步交互的特征,对Ajax新技术具备的独
[目的]:通过对DNA甲基转移酶(DNMT1,DNMT3A,DNMT3B)及错配修复基因hMLH1在正常卵巢组织、原发性上皮性卵巢癌组织中的蛋白表达状况的研究,探讨它们在原发性上皮性卵巢癌患者
越来越多的研究表明血管内皮生长因子(VEGF)及其受体参与白血病的发病及预后,以VEGF为靶点在白血病治疗中的作用受到人们的重视。可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)是VEGF
Ceresana咨询公司发布了全球塑料母粒的市场报告,预计到2024年,全球塑料母粒市场将以每年3.7%的速度增长。该报告显示,2016年全球共消费400多万t的塑料母粒,其中亚太地区色母
为探究绿色供应链中供应商与核心企业的合作关系,在分析供应商和核心企业在不同策略下各自的成本和收益的基础上,运用演化博弈理论构建一个供应商与核心企业的演化博弈模型,模型
目的 探讨特发性血小板减少症(ITP)患者抗核抗体(ANA)检测的临床意义.方法 选取2008 年1 月~ 2013 年11 月收治的63 例ITP患者为观察组,另选取同期63 例健康体检患者为对照组,两组
《骆驼祥子》中祥子悲剧命运的成因一直众说纷纭,很多人认为个人主义最后总造成了祥子的悲剧,外在原因仅起到催化剂的作用。但是祥子的命运悲剧并非是个人主义的悲剧,社会对