大鼠脐带间充质干细胞对肝细胞增殖、凋亡及功能的影响

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liusiyu111
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的探讨肝衰竭大鼠血清对脐带间充质干细胞(UMSCs)表面免疫学标记CD86的影响。了解UMSCs对大鼠原代肝细胞增殖、凋亡与功能的影响。方法采用胶原酶和胰酶两步法分离UMSCs,采用贴壁法培养、纯化;观察细胞形态特征及生长状态;流式细胞仪检测UMSCs细胞表面分子标记CD90、CD105;将达70%~80%融合的第3代UMSCs随机分为正常培养基组,正常血清组(含10%正常大鼠血清培养基),肝衰竭血清组(含10%肝衰竭大鼠血清培养基)。以上措施干预培养24h后用流式细胞仪定量监测细胞表面免疫学标记CD86的变化。用胶原酶灌注法分离大鼠肝细胞,肝细胞与UMSCs应用Transwell共培养。原代大鼠肝细胞分为三组:UMSCs组、大鼠原代肝细胞组及UMSCs与大鼠原代肝细胞共培养组,分别于共培养第1d、3d、5d、7d通过MTT法检测各组细胞增殖能力;UMSCs与肝细胞共培养组、肝细胞组,采用脂多糖(LPS)诱导肝细胞凋亡,于共培养24h后采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;收集各组细胞共培养第1d、3d、5d培养上清液,ELISA法检测上清液中白蛋白含量。结果1.采用胶原酶和胰酶两步酶法能获得大量的单个UMSCs,在体外可以稳定的生长、扩增。流式细胞仪检测结果显示,分离得到的细胞稳定表达相关抗原标记CD90、CD105,表达率为99.7%、99.5%。2.不同组诱导培养UMSCs24小时后,正常培养基组、正常血清组,肝衰竭血清组细胞表面CD86表达率为0.5%,0.6%,0.4%。相比差异无统计学意义(P>0.05)。3.(1)UMSCs与原代大鼠肝细胞共培养组在第1d、3d、5d、7d的OD值大于相应时间点的UMSCs组OD值与原代大鼠肝细胞组OD值之和(P<0.05)。(2)诱导肝细胞凋亡后,流式细胞仪检测阳性对照组、阴性对照组及UMSCs密度为1*104/ml、1*106/ml与肝细胞共培养组凋亡率分别为93.3%、54.2%、59.7%、72.9%,相比差异有统计学意义(P<0.05)。(3)UMSCs无白蛋白分泌能力,UMSCs与大鼠原代肝细胞共培养组培养上清液中白蛋白水平第1d、3d、5d均较原代大鼠肝细胞组明显升高(P<0.05)。结论胶原酶和胰酶两步消化法是一种简单、可靠的分离UMSCs的方法;大鼠UMSCs稳定表达相关抗原标记CD90、CD105。经肝衰竭大鼠血清干预培养UMSCs后CD86仍不表达。UMSCs在体外可以促进肝细胞增殖,抑制其凋亡,并具有增强白蛋白分泌的功能。
其他文献
通过对医院网络建设的规划及实施,使用双核心网络建设、vlan划分、网络模块化设计等,构建安全稳定的医院内网网络架构,充分发挥网络在医院信息系统中的应用,使网络成为支撑医
2012年初颁布的《义务教育语文课程标准(2011年版)》大大提高了对于“文化”的关注程度,加强了社会主义核心价值体系在语文课程中的渗透,格外关注传统文化的继承,教育要关注
近年来,档案管理的发展遇到了一些技术上的瓶颈。传统的档管模式难以克服自身的不足。而云技术的应用则为档管提供了一个新的思路。相关"云档案"模式成功案例非常值得档管人
货架是现代化仓库不可或缺的组成部分,选择合适、品质优良的货架能够提升仓库管理的水平及效率,同时也可以降低仓储管理的成本。
任何文化都是生长于一定人类共同体的具体的、现实的带有特殊性的文化,可称之为个性文化。文化模式是个性文化中由基本行为规范及其运作模式组成的统一的恒定的行为模式。文
管理,是企业健康发展必不可少的一个重要环节。企业发展必须赚钱,但是赚钱是有风险的,这就要求每一家企业都要做好危机管理工作。当然,这里所说的危机管理,不是危机来了才开始管理
建立了一种基于气相色谱-质谱法(GC-MS)同时检测茶叶中13种农药残留的检测方法。茶叶样品以Qu ECh ERS(Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe)方法进行提取,采用乙腈提取
脓毒症(sepsis)是由感染引起的全身炎症反应综合征(systemic inflammatoryresponse syndrome, SIRS),是住院危重患者的主要死亡原因之一。脓毒症的发病机制比较复杂,涉及到各个
股权收购成为企业并购的最常用方式,我国相关部门陆续出台了系列准则与法规,适应新形势下经济发展需求,对股权收购交易的会计核算与税务处理进行规范。政策的完善与更新对企
建立了茶叶中多种农药残留的分析方法。粉碎后的茶叶样品以乙腈为提取溶剂经超声萃取,萃取液再经石墨化碳固相萃取柱净化,采用GC-EI-MS的选择离子监测(SIM)方式和外标定量方法,同