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本研究以我国鲆鲽类主导养殖品种—半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)为研究对象,克隆了两种视黄酸受体RARα和RARγ,分析了其基因结构,探究了RAR基因在皮肤等各个组织中的表达情况,揭示了其与黑色素数量分布的关系。查明了半滑舌鳎胚胎发育和仔稚幼鱼生长发育阶段两种视黄酸受体的发育模式及其表达调控特征,探明了半滑舌鳎幼鱼中两种视黄酸受体对不同光照强度的应答机制,分析了其与其它体色相关功能基因POMCa、POMCb,MCH1、MCH2等基因的表达调控的关系为深入认识半滑舌鳎无眼侧黑化调控机制提供了基础资料。主要研究结果如下:1.半滑舌鳎RARα和RARγ克隆及组织表达特性利用RT-PCR和RACE方法获得了半滑舌鳎2种视黄酸受体RARα和RARγ的cDNA全长序列,并采用定量PCR技术分析了其组织表达特性。半滑舌鳎RARαcDNA序列全长为1823 bp,编码443个氨基酸;RARγcDNA序列全长为1959 bp,编码489个氨基酸。同源性分析显示半滑舌鳎RARα和RARγ同源性高达60.8%,与牙鲆同源性高达97.0%,具有较强的进化保守性。系统进化分析显示半滑舌鳎RARα和RARγ分别归属于单独的分支,且与其它鱼类聚合成簇。组织表达分析显示,RARαmRNA在肾中表达量最高,而RARγmRNA在脾中表达量最高,RARα和RARγmRNA在其他组织中均检测到表达,表明半滑舌鳎两种RAR都可能参与多种生理过程调控。半滑舌鳎两种RAR mRNA在有眼侧皮肤、无眼侧黑化皮肤和无眼侧正常皮肤中的表达量依次升高,且发现RARα在正常有眼侧皮肤的表达高于RARγ,而RARγ在无眼侧正常皮肤中的表达显著高于RARα,无眼侧黑化皮肤中RARα表达高于RARγ。RAR基因在有眼侧和无眼侧皮肤组织中的差异表达可能和RA/RAR系统调节体色有关。2.半滑舌鳎两种视黄酸受体在早期生长发育阶段的表达调控特性为深入认识半滑舌鳎RA/RAR信号系统在早期生长发育阶段的表达特性及调控作用,查明了两种视黄酸受体RARα和RARγ在配子、胚胎发育和仔稚幼鱼生长发育阶段的时空表达特征,并揭示了其与4种体色相关因子表达调控的关系。半滑舌鳎RARα和RARγ都具有母源或父源遗传的特性。在胚胎发育阶段,这两个基因在原肠胚期之前表达水平均较低,但在胚体包被卵黄囊1/2时显著升高,但在孵化出膜期又下降至胚体包被卵黄囊1/2时同等水平,这些结果表明RARα与RARγ均参与了半滑舌鳎胚胎发育过程中胚体形成、器官发育的调控。在仔稚幼鱼阶段,RARαmRNA表达水平在30d前苗种中表达水平较高,其后显著降低并保持较低表达水平至180d幼鱼。RARγmRNA表达水平在仔稚幼鱼阶段表达水平变化表现出与RARα类似的趋势,但其在30d前各阶段表达水平无显著差异,只是在30d变态完成时显著升高,但在40d后又显著下降至较低水平。统计分析表明,胚胎发育阶段RARαmRNA表达水平与MCH1 mRNA表达水平呈正相关关系,而RARγmRNA表达水平与MCH1 mRNA表达水平呈显著正相关关系。同时,POMCb mRNA表达水平与RARα、RARγmRNA表达水平均呈显著正相关关系。仔稚幼鱼RARγmRNA表达水平与POMCa mRNA表达水平呈显著正相关关系,而RARαmRNA表达水平也与POMCa mRNA表达水平也呈正相关关系。同时,RARα、RARγmRNA表达水平均与POMCb mRNA表达水平呈显著正相关关系。在早期生长发育阶段,RARα与RARγmRNA表达水平都呈显著正相关关系,表明其可能通过协同作用在早期生长发育阶段起调控作用。3.视黄酸受体在光照诱导半滑舌鳎无眼侧黑化中的作用研究查明了四种不同光照强度条件对半滑舌鳎幼鱼无眼侧体色的影响,发现强光照(500 lx)条件下虽然实验鱼体重增重率较高,但其无眼侧黑化率高、成活率较低,而中光照强度(300 lx)条件下具有较高的成活率、体重增重率和较低的无眼侧黑化率,因此具有较强的生产应用价值。探明了两种视黄酸受体RARα和RARγ对不同光照强度的应答特性,强光组实验鱼脑组织RARαmRNA具有高表达水平,而弱光(100 lx)组个体眼中具有RARαmRNA最高表达水平。脑中RARγmRNA在中光组和黑暗组(0 lx)有较高表达水平,而眼中RARγmRNA高表达水平出现在中光组和弱光组。强光组和中光组中无眼侧黑化的实验鱼脑RARαmRNA表达水平高于无眼侧正常个体,而与眼中RARαmRNA表达趋势相反,RARγmRNA表达也存在类似的趋势。RARαmRNA表达水平与POMCa、POMCb、MCH1呈强的负相关关系,而与RARγmRNA表达水平呈强的正相关关系。RARγmRNA表达水平与POMCb mRNA表达水平呈显著正相关关系,而与POMCa、MCH2、MCH1mRNA表达水平呈强的负相关关系,表明这两种视黄酸受体基因与其它体色相关功能基因一起,通过协同或拮抗的互作方式共同参与了光照诱导半滑舌鳎幼鱼无眼侧黑化的调控过程。