近年来,随着科学技术的发展,蛋白质的检测技术对于医疗诊断、药物开发、生态安全等领域越来越重要。传统的免疫反应检测方法灵敏度低,特异性差。在这种情况下,蛋白质传感器由于其高灵敏度、低成本及高稳定性等优点受到越来越多的关注。基于此,我们构建了两种蛋白质传感体系。第一种是基于独特的金属-配体电荷转移(MLCT)作用下的比色分析法检测碱性磷酸酶(ALP)活性。在ALP的作用下,底物抗坏血酸磷酸酯(AAP)被催化水解生成抗坏血酸,抗坏血酸可还原Cu2+变为Cu+。随后,Cu+与二喹啉甲酸(BCA)结合生成显色络合物Cu(BCA)+,溶液颜色也由无色变为紫色,并在562nm波长处有明显吸收峰。该方法快速简便,可通过肉眼定性观察判断ALP活性水平,同时,在0-200 mU mL-1的范围内有很好的线性范围,检测限达到1.25 mU mL-1。结果表明该方法具有良好的选择性,在筛选抑制剂上也有很大潜力。更重要的是,该方法在检测未稀释的人体血清样品的ALP水平时也表现出很好的检测性能。第二种是基于末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)引发聚合的超灵敏检测蛋白质芯片生物传感器。利用两个不同的凝血酶适配体来捕获凝血酶分子,形成三明治结构来提高传感器的特异性识别。其中一个末端修饰氨基的适配体固定在预处理后的硅基芯片表面,另一个适配体的3’末端暴露在硅片表面,利用TdT酶催化加尾的性质在适配体末端添加聚合带有荧光素标记的dATP作为信号放大。在最优试验条件下,该三明治结构的生物传感器在100 fM到0.1 μM的检测范围内均有良好的线性关系,检测下限达到8.35 fM。此外,该传感器在人血清样品中对凝血酶也有较好的检测分析性能。以上两种检测体系均具有较高的灵敏度和选择性,操作简便,成本较低,可广泛应用于疾病诊断、临床预后、环境监测等领域。