目的：利用高糖诱导体外人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical VeinEndothlial Cells, HUVECs），构建高糖损伤模型，检测血管紧张素转换酶抑制剂（Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitors, ACEI）福辛普利干预后HUVECs凋亡及细胞间黏附分子-1（Intercelluar Adhesion Molecule-1,ICAM-1）和血管细胞黏附分子-1（Vascular Cell Adhesion Molecule-1,VCAM-1）蛋白表达量的改变，进一步探讨福辛普利对高糖诱导的HUVECs损伤是否有保护作用。方法：以0.1%I型胶原酶消化人脐静脉内皮37℃15-20min，分离获取原代HUVECs，并加入低血清内皮细胞专用培养基培养，在37℃、5%CO2孵箱内培养至融合后传代；将第1-2代细胞用于实验，避免发生细胞年龄相关的HUVECs损伤。1构建高糖损伤模型将HUVECs接种于6孔板中，分组培养：①正常对照组(5mmol/L D-葡萄糖)、②持续性高糖组(20mmol/L D-葡萄糖)、③波动性高糖组（5mmol/L与20mmol/L D-葡萄糖，每24小时交替），各组每24小时更换新鲜培养基，共孵育48小时完成培养。2药物处理④⑤⑥组是在持续性高糖组基础上再分别给予0.1umol/L、1umol/L、10umol/L福辛普利进行干预，每24小时更换新鲜培养基，共孵育48小时完成培养。3HUVECs凋亡率的检测实验结束后0.25%胰蛋白酶消化并收集细胞，细胞悬液移至流式管内，预冷4℃PBS洗涤细胞1次，每组加入300μL1×Binding Buffer悬浮细胞，并加入5μLAnnexin V-FITC室温避光孵育15分钟，上机前加入5μLPI，最后补加200μL1×Binding Buffer。流式细胞仪计数每组细胞凋亡率，每次计数30000个细胞。4HUVECs凋亡形态的观察分组培养结束后每孔加入0.5ml4%多聚甲醛固定10-20分钟，PBS洗涤2次，每次大约3分钟，每孔加100ul Hoechst33258荧光染色液，室温避光孵育10分钟，PBS再次洗涤2次，每次大约3分钟，在荧光倒置显微镜下观察HUVECs凋亡形态并拍片。5ICAM-1和VCAM-1蛋白表达量的检测完成分组培养后，0.25%胰蛋白酶消化并收集细胞，将细胞悬液移至流式管内，PBS洗涤细胞1次，预留约100ul上清液制成细胞悬液，每组加入20ul FITC标记的抗人ICAM-1抗体和20ul PE标记的抗人VCAM-1抗体，PBS再次洗涤细胞3次，流式细胞仪检测每组ICAM-1和VCAM-1蛋白表达量，每次计数30000个细胞，结果以平均荧光强度(meanfluorescence intensity, MFI)表示。结果：1流式细胞仪检测①②③组间细胞凋亡率有统计学差异（F=10.697,p=0.004）。其中与①正常对照组相比，②持续性高糖组HUVECs凋亡率是明显升高的(2.22±1.38VS5.23±0.98，p=0.007)，③波动性高糖组也升高（2.22±1.38VS5.96±1.25，p=0.002）。2流式细胞仪检测②④⑤⑥组间细胞凋亡率有统计学差异（F=3.656,p=0.044）。与②持续性高糖组相比，⑤持续性高糖+1umol/L福辛普利组（5.23±0.98VS3.22±1.12, p=0.033）和⑥持续性高糖+10umol/L福辛普利组（5.23±0.98VS2.71±1.50, p=0.011）都明显降低细胞凋亡率。然而福辛普利各剂量组间细胞凋亡率无统计学差异（p>0.05）。3荧光倒置显微镜观察并拍片发现，与①正常对照相比，细胞核荧光着色在②持续性高糖组和③波动性高糖组明显增强，且可见细胞核呈分叶和碎片状。（Fig.6）4流式细胞仪分析HUVECs表面ICAM-1蛋白表达量在①②③组间有统计学差异（ⅹ2=6.86, p=0.032）。与①正常对照组相比，蛋白表达量在②持续性高糖组（p=0.048）和③波动性高糖组都明显升高（p=0.013）。（Fig.7）5流式细胞仪分析HUVECs表面ICAM-1蛋白表达量在福辛普利干预后，只有在⑥持续性高糖+10umol/L福辛普利组明显降低（49.44±21.87VS111.93±56.07, p=0.04）。蛋白表达量在福辛普利各剂量组间无统计学差异（p>0.05）。6流式细胞仪分析HUVECs表面VCAM-1蛋白表达量在①②③组间无统计学差异（F=0.522, p=0.61），并且在福辛普利干预后VCAM-1蛋白表达量也无统计学差异（F=1.69, p=0.209）。结论：1持续性高糖能诱导HUVECs凋亡，波动性高糖诱导细胞凋亡的作用更强。2福辛普利能抑制高糖诱导的HUVECs凋亡。3持续性高糖和波动性高糖明显升高HUVECs表面ICAM-1蛋白表达，然而由于观察时间较短并未发现VCAM-1蛋白表达明显升高。4福辛普利干预后能明显抑制高糖诱导的HUVECs表面ICAM-1蛋白表达。