海南捕鸟蛛毒蛋白的分离纯化与性质鉴定

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本文采用软管刺激排毒法从海南捕鸟蛛(Ornithoctonus hainana)中采取了毒液,对粗毒液进行分析发现,粗毒中蛋白含量为79.6%,粗毒对蟋蟀的LD50值为0.042mg/g,LD50的95%置信区间为0.039~0.045mg/g。应用反相层析和阳离子交换分离方法,从海南捕鸟蛛粗毒中分离纯化出一种对小鼠无毒但对昆虫有毒的毒素组分,命名为海南捕鸟蛛毒素a(HNTXa)。SDS-PAGE电泳图显示该毒素组分分子量较小,IEF-PAGE电泳图显示其等电点在8.15和8.45间。该毒素对鳞翅目棉铃虫和同翅目蟋蟀均有毒性,72h之后棉铃虫死亡率达30%;对蟋蟀的LD50值为0.058mg/g,LD50的95%置信区间为0.055~0.062mg/g。 对该毒素进行蛋白质N端测序,结果发现该毒素有两个N端,这表明该毒素或者是一个不纯的物质,它由两个分子量近似的蛋白组成;或者是一个由两条肽链组成的蛋白。 本文应用先进的反相层析技术对海南捕鸟蛛粗毒进行分离纯化。反相层析具有快速、高效和比较高的回收率等特点,所以在分离和制备上有它独特的优越性。国内外在蜘蛛毒液的分离纯化上大多采用此种方法。
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