液压脑损伤后大鼠脑血管钝性损伤的研究

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目的:本实验通过建立大鼠侧位液压脑损伤模型,研究液压脑损伤后损伤侧和非损伤侧大血管形态和生理功能改变及微血管损伤与脑水肿的关系,为颅脑创伤后损伤侧和非损伤侧脑血管改变的研究提供实验依据。方法:1、成年健康雄性SD大鼠45只,采用完全随机法分为正常对照组、假手术组、实验组,实验组又分为液压脑损伤后6h、24h及72h组,每组9只。利用改良的侧位液压损伤装置建立大鼠颅脑损伤模型。应用光镜、透射电镜观察大鼠损伤侧和非损伤侧大脑中动脉主干形态学改变,应用免疫组化法检测不同时间点大鼠损伤侧和非损伤侧大脑中动脉缝隙连接蛋白40(connexin40, Cx40);缝隙连接蛋白43(connexin43, Cx43)表达的改变。2、成年健康雄性SD大鼠30只,采用完全随机法分为正常组、假手术组、实验组,其中实验组分为6h、24h、72h组,每组6只,利用液压冲击法建立大鼠颅脑损伤模型,显微镜观察损伤侧损伤区域和非损伤侧相应区域脑皮质微血管改变情况,CD34标记血管内皮细胞(Endothelial Cell, EC),采用微血管计数法来检测微血管密度(Microvesseldensity, MVD)改变,干湿重法检测脑组织含水量的变化。结果:1、液压脑损伤后损伤侧和非损伤侧大脑中动脉均有不同程度损伤,主要表现为血管管腔缩小,内皮细胞形态结构改变,内弹力膜皱缩,平滑肌细胞水肿变形。损伤后72h电镜下可见损伤侧内弹力膜断裂,部分平滑肌细胞核固缩,异染色质增多,非损伤侧改变较轻微;与假手术组相比,实验组大鼠损伤侧和损伤侧大脑中动脉血管壁细胞Cx40、Cx43表达增加(P<0.05),24h达蛋白表达达高峰,尤以损伤侧增加明显。2、液压脑损伤后大鼠两侧脑皮质微血管均有不同程度皱缩、扭曲,血管周围间隙增宽,损伤后24h和72h组可见微血管内有血栓形成;与假手术组相比脑皮质微血管计数明显降低(P<0.05),以损伤侧为重;实验组损伤侧和非损伤侧脑皮质含水量升高,与假手术组相比差异有统计学意义(P<0.05);脑皮质微血管计数与脑组织含水量呈负相关(r=﹣0.76, P<0.01)。结论:1、液压脑损伤后损伤侧因直接受外力作用,大脑中动脉血管结构改变,管壁内皮细胞出现凋亡表现,非损伤侧则出现内皮细胞变性脱落,平滑肌细胞水肿等改变;同时损伤侧和非损伤侧管壁细胞Cx40和Cx43表达均增加。提示创伤性脑损伤后力线作用方向和非力线作用方向均存在颅内大血管结构和生理功能改变。2、液压脑损伤后损伤侧和非损伤侧脑皮质微血管扭曲变形,部分血管内可见血栓形成,同时两侧脑组织微血管内皮细胞密度均减低,其降低程度与脑水肿程度吻合。提示创伤性脑损伤后不仅外力直接作用方向微血管有损伤,远隔部位亦可见损伤性改变,脑皮质微血管密度降低是创伤性脑水肿的病理基础。
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