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目的:了解云南地区慢性HBV感染者病毒基因型的感染情况及病毒变异位点检测情况,以进一步探讨慢性HBV感染者病毒基因型、常见变异位点与肝细胞癌的关系。方法:应用核酸扩增荧光定量和测序法检测云南地区慢性HBV感染者包括慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和乙肝合并肝癌共120例血清标本(其中HBeAg阳性56例HBeAg阴性64例,男80例女40例)的病毒基因型及HBV变异。在自动化基因分析仪上进行测序,用定量法及Chromas程序对结果进行判断;用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测HBV DNA定量。用酶联免疫吸附试验法检测HBV血清抗原抗体标志物,用统计学方法对结果进行分析。所有的数据均采用SPSS13.0统计软件包,对检测数据进行统计学处理。统计描述计数资料采用例数构成比表示,计数资料两样本构成比采用四格表资料的x~2检验,多样本构成比采用行×列表资料的x~2检验,当样本例数比较<40采用四格表确切概率法,筛选影响因素采用二分类Logistic回归分析,所有结果均采用双侧检验,P<0.05,差异有统计学意义。结果:1、云南地区HBV基因型以C型为主,占67、5%(81/120),B型占22、5%(39/120),未发现A、D、E、F、G、H、I型。HBV基因型在CHB、LC、HCC三组中分布分别为B基因型26(43.3%)、8(20.0%)、5(25.0%)例;C基因型34(56.7%)、32(80.0%)、15(75.0%)例,差异有统计学意义(P<0.05)。在肝硬化和肝细胞癌患者中,C基因型比例占绝大多数,将二者合并与慢性乙型肝炎相比较,二者C基因型所占比例显著高于慢性乙型肝炎组,差异有统计学意义(P<0.05)。2、HBeAg阳性慢性HBV感染者中B、C型所占比例为33.9%(19/56)、66.1%(37/56);HBeAg阴性慢性HBV感染者中,B、C型所占比例分别为20(31.3%)、68.7%(44/64),两组基因型构成的差异无统计学意义(P>0.05)。3、80例男性患者中B基因型有23例(28.8%),C基因型有57例(71.3%);40例女性患者中B基因型有16例(40.0%),C基因型有24例(60.0%)。男女各种基因型构成比经统计学处理差异无统计学意义(P>0.05)。4、120例慢性HBV感染者BCP区、PC区、C区变异位点检测结果:B基因型BCP区、PC区、C区变异分别为13、16、6例;C基因型中BCP区、PC区、C区变异分别为55、43、21例。C基因型患者BCP变异多于B基因型,差异有统计学意义(P<0.05)。PC与C区变异在B、C基因型中分布差异无统计学意义(P>0.05)。5、BCP变异在CHB、LC与LCC三组疾病中的分布分别为B基因型中4、4、5、例,C基因型中21、28、6例,C基因型发生BCP变异高于B基因型差异有统计学意义(p<0.05);PC变异在CHB组、HCC组与LC组中的分布分别为B基因型中8、2、6例,C基因型中20、14、9例,CHB、LC与HCC组中C基因型发生PC变异高于B基因型差异有统计学意义(p<0.05);197变异在CHB组、LC组和HCC组分布分别为B基因型中0、5、1例,C基因型中10、6、5例,CHB组和LC组C基因型发生197变异高于B基因型差异有统计学意义(p<0.05)。但在HCC组里B与C基因型发生197变异差异无统计学意义(p>0.05)。6、HBeAg阳性慢性HBV感染者中BCP和PC变异分别占46.4%和21.4%,HBeAg阴性慢性HBV感染者中BCP和PC变异分别占65.6%和73.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。7、将120例慢性HBV感染者分为肝癌组20例和非肝癌组100例,进行各变量多因素回归分析,结果显示基因型C、病毒变异、HBeAg阴性均与HCC有密切关系(P<0.05)。结论:1、本次研究发现云南地区120例慢性HBV感染者(包括慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和乙肝合并肝癌)中基因型存在B型、C型,以C型为主,未发现其它基因型。2、慢性HBV感染者基因型与临床疾病谱有关,C基因型与较为严重的肝病(乙肝肝硬化和乙肝合并肝癌)有关。3、基因型C在HBeAg阳性和HBeAg阴性慢性HBV感染者中分布相似。4、乙型肝炎病毒基因型的构成比与性别无关。5、BCP变异在基因型C中明显多于基因型B。BCP变异在HCC、LC和CHB三组中,C基因型均多于B基因型。CHB、LC和HCC组中C基因型感染者PC变异也明显多于B基因型。CHB和LC组中C基因型感染者197变异明显多于B基因型。6、在HBeAg阴性慢性HBV感染者中BCP和PC变异明显多于HBeAg阳性慢性HBV感染者。7、基因型C、HBV变异与HCC的发生有密切关系,C基因型与HBV变异是否与疾病进展,加重病情从而促进HCC的发生有关,其具体的机制值得进一步探究。