健脾法下调大鼠肝癌若干新基因的克隆及信号转导基因的研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaomay2
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:在大范围地揭示出健脾益气法下调大鼠肝癌高表达基因谱的基础上,关注其中信号转导相关基因国际研究进展,以及率先克隆出该治法下调显著EST片段的cDNA完整表达序列,为进一步揭示中医治疗肝癌重要法则——健脾益气法作用机制奠定基础。 方法:采用基因芯片技术检测不同中医治法对大鼠肝癌基因转录的调节作用,进一步筛选出芯片结果中健脾益气法下调的有关信号转导基因,并跟踪国际最新研究进展;同时分别采用经典的cDNA文库筛选,以及电子克隆与PCR相结合的筛选方法,克隆出有关EST片段的cDNA完整表达序列。 结果:(1)本研究发现在各不同中医治法中,健脾益气法对大鼠肝癌基因转录调整的面最宽,其中健脾益气法能明显下调的基因高达689个;(2)从基因芯片结果中,本研究筛选到健脾益气法明显下调的信号转导有关已知基因19个;(3)运用经典的cDNA文库筛选方法,成功筛选出编号为G9的EST片段的完整cDNA序列;(4)采用EST电子克隆技术与PCR技术相结合的方法,成功筛选出11个EST片段的cDNA序列(G2、G4、G5、G6、G11、G14、G15、G16、G17、G18、G20),在克隆出的11新基因中,经进一步BLAST对比分析,证明G14、G15、G20等3个基因为新基因,并进行GenBank等录,分别命名为:大鼠肝癌中健脾益气药物下调的基因GDY14、GDY15、GDY20,登录号分别为DQ480745、DQ480746、DQ480747。 讨论:本研究成功运用AffymetrixRat230A生物芯片大通量的检测不同中医治法对大鼠肝癌基因转录水平上的差异,在国内外率先发现一批不同中医治法能明显调整的基因。同时,本研究在充分利用生物信息学资源的基础上,成功克隆出4个中医健脾益气法能明显调控的新基因的cDNA序列,这为今后进一步深入观察这些基因的功能,以及深入探讨不同中医治法的作用机制打下良好的研究基础,也为中医药基础研究的国际化开展了成功的尝试。
其他文献
目的:研究小儿反复呼吸道感染(RRTI)的中医证候分布规律和影响因素。 方法:通过对国内外2000-2005年相关文献的系统回顾,总结本病中医证候的文献分布规律和可能影响因素;设计
目前全世界甲状腺癌的发病人数正逐渐攀升,我国也不例外。以上海为例,近20年来,上海市民的甲状腺癌发病率翻了3倍。女性患者人数约为男性的3至4倍,甲状腺癌为何会有“女人缘
德国研究人员在新近出版的叶英国医学会杂志曳上发表的一项研究报告称袁人们在日常生活中只要坚持5种健康的生活习惯袁就能降低罹患结肠/直肠癌的危险遥研究人员对347 000名
本文旨在观察中药化浊益肾解毒汤治疗消渴肾病的临床疗效,取2003年10月~2005年1月长春中医学院附属医院住院病例及门诊病例60例,随机分为两组,两组均应用口服降糖药或/和胰岛素控
目的:   观察益肾调督针法对脑梗塞恢复期细胞因子的影响;并比较益肾调督取穴针法和普通取穴针法的优与异。   方法:   临床确诊为脑梗塞患者,中医辨证属中经络之气
寻求灵感并给他人以启迪——这是罗娅·汉堡(RoyaHamburger)在生活和工作中奉行的座右铭。话虽然简单,却道出了她的全部心声。“听起来很俗,不过我的工作确实就是我最大的爱
为了经济合理地利用水力资源,积极地应用科学方法去生产、调度,我们以“电力系统水调自动化功能规范”为依据开发了一个由水情信息采集、流域监视、实时洪水预报、降水(或迳
想来想去,比来比去,没有任何一个数字比“5”与肿瘤的关系更加密切,没有任何一个数字比“5”对肿瘤病人更加重要。所以,我将“5”称为肿瘤病人的幸运数字(lucky number)。预
目的:观察加味苇茎汤治疗痰热蕴肺型AECOPD患者的临床疗效,以及对AECOPD患者血TNF-α、D-二聚体和凝血功能的影响;观察AECOPD患者是否存在血栓前状态;探讨AECOPD患者炎症反应与血
宽纹豆芫菁Epicauta watwerhousei属鞘翅目,芫菁科,豆芫菁属,是豆类作物及蔬菜的食叶害虫。豆芫菁属昆虫的成虫分泌的斑蝥素,早在李时珍的《本草纲目》中已记载有起泡、利尿、壮