90株鲍曼不动杆菌OXA基因研究及ISAba1对OXA-23基因表达的影响

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目的:检测皖南地区临床分离的鲍曼不动杆菌ISAba1和OXA基因流行趋势,以及研究ISAba1对OXA-23基因表达的影响。方法:采用VITEK 2 compact全自动微生物鉴定仪检测90株非重复的鲍曼不动杆菌,多重聚合酶链式反应(MPCR)检测OXA基因和插入序列(ISAba1)。TA克隆耐药基因全序列blaoxa-23、插入序列ISAba1和ISAba1-blaoxa-23,构建基因重组质粒,转化到大肠埃希菌DH5α中,后经转化到大肠埃希菌Rosetta(DE3)表达宿主菌株;SDS-PAGE检测pET28b(+)-blaoxa-23、pET28b(+)-ISAba1、pET28b(+)-ISAba1-blaoxa-23和转化子(pET28b(+))在表达菌株中的表达,通过肉汤稀释法测定表达后的阳性菌株和转化子对亚胺培南和美罗培南的最低抑菌浓度(MIC)。结果:90株非重复鲍曼不动杆菌,blaoxa-23基因阳性的菌株有73株,blaoxa-51基因阳性的菌株有90株,ISAba-1基因阳性的菌株有86株,未检测到blaoxa-24基因、blaoxa-58基因阳性菌株。其中17株未检测到blaoxa-23基因阳性的菌株中有11株对亚胺培南敏感,其中11株中有4株未检测到ISAba1。肉汤稀释法测定表达后的阳性菌株pET28b(+)-blaoxa-23、pET28b(+)-ISAba1、pET28b(+)-ISAba1-blaoxa-23和转化子(pET28b(+))对亚胺培南MIC值分别为4ug/ml、1ug/ml、64ug/ml和0.12ug/ml;对美罗培南MIC值分别为4ug/ml、0.5ug/ml、16ug/ml和0.03ug/ml。结果显示ISAba1对blaoxa-23基因的表达有影响。结论:本地区鲍曼不动杆菌流行以blaoxa-51和blaoxa-23为主,发现同时不含blaoxa-23基因和ISAba1的菌株对碳青霉烯类抗生素敏感,而含有此基因型及插入序列的菌株耐药性较高,证实了鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类抗生素与携带blaoxa-23基因和ISAba1高度相关,ISAba1对blaoxa-23的高表达可能是该菌对碳青霉烯类抗菌药物高度耐药的主要原因。
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