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目的：1.建立一种辣根过氧化酶(HRP)电化学检测法。2.建立一种免疫磁珠检测肿瘤标志物的电化学方法。3.考察免疫磁珠检测肿瘤标志物与酶联免疫法的相关性。方法：1.3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)-过氧化氢(H2O2)-HRP体系中HRP和HRP标记物的电化学检测方法。采用碳浆印刷电级为工作电极；检测体系为0.8mmol/L TMB溶液15μL,15mmol/L的H202溶液25μL,加入HRP5.0×10-10g/mL4μL充分混合,滴加到印刷电极上,反应5min后进行测定。设定电压范围-0.1V-0.4V,先用循环伏安法进行定性分析,然后再用差分脉冲伏安法(DPV)进行定量测定。2.免疫磁珠在肿瘤标志物中的应用免疫磁珠按如下方法制备：首先,将链霉亲和素结合在带有环氧基官能团的磁珠上,利用链霉亲和素和生物素结合的特异性,将生物素标记的CA199结合在磁珠上,形成生物素化的抗体磁珠复合物。最后用1%的BSA封闭活性磁珠上的位点。若标本中存在相应的抗原则加入HPR标记的酶标抗体后,经过洗涤除去未结合的酶标抗体,最后形成抗原-抗体-酶标抗体-磁珠的免疫复合物。利用磁珠的磁性可将此免疫复合物固定在磁场中的印刷电极上,加入底物缓冲溶液,用DPV进行检测。结果：1.DPV检测HRP浓度,在1.1×10-13～5.0×10-11g/mL浓度范围内与响应信号成线性,检测限为8.7×10-13g/mL。2.电化学响应信号与CA199抗原的浓度成线性,线性范围为3.0-60U/L。日间重复日内精密度为0.7～1.4%,日间精密度为1.0～6.9%。检测限为1.6U/mL。考察了制备免疫磁珠的稳定性,无保护剂的存在下稳定性为7天。结论：1.实现了电化学检测HRP及HRP标记物的方法,该方法简单快速、成本低、灵敏度高。2.实现了免疫磁珠在肿瘤标志物中的应用,该方法快速、灵敏度高、适用于临床标本的检测。3.建立了免疫磁珠检测CA199抗原的方法,与酶标免疫吸附测定有较好的相关性。