黑木耳多糖AAP3-1和硫酸酯化产物SAAP的降血糖功能研究

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黑木耳(Auricularia auricular)是我国重要的食用菌作物之一。黑木耳中含有大量的活性成分-黑木耳多糖。由于黑木耳多糖具有重大保健价值而备受学术界重视,本文在前人工作的基础上开展了对黑木耳多糖的提取、分离纯化、分子修饰、降血糖活性等方面的研究。用超声波辅助水提方法提取黑木耳中的水溶性多糖,以响应面分析方法优化提取工艺,得到黑木耳水溶性多糖最佳提取条件为:水提时间123.52min ,超声功率561.11W,超声时间25.76min ,液料比111.44:1 (mL/g)。黑木耳经超声波辅助水提、乙醇沉淀得到黑木耳水溶性多糖粗品,再用Sevag法脱蛋白、双氧水脱色、透析得到黑木耳水溶性多糖精品,苯酚-硫酸法测定多糖含量为41.70%。经DEAE Sephadex A-25离子交换色谱和Sephadex G-200凝胶色谱分离纯化得到AAP3-1。用凝胶色谱Sephadex G-100和凝胶渗透色谱(GPC)进行纯度鉴定。凝胶色谱Sephadex G-100和凝胶渗透色谱法检验得到的峰形都为单一对称峰,表明得到纯度较高的黑木耳多糖AAP3-1。凝胶渗透色谱法测定AAP3-1的重均分子量(MW)为1.19×104。苯酚-硫酸法测定黑木耳多糖含量为81.05%。红外光谱结果表明AAP3-1具有多糖的特征吸收峰。对黑木耳多糖硫酸酯化的制备方法进行了初步研究,并比较了黑木耳多糖AAP3-1和硫酸酯化后的黑木耳多糖SAAP的降血糖功能,得出黑木耳多糖AAP3-1和SAAP可在一定范围内降低正常小鼠血糖,同时升高肝糖原的含量。灌胃黑木耳多糖AAP3-1和SAAP 6d后,AAP3-1与SAAP可以降低糖尿病小鼠的血糖同时升高肝糖原含量。并且SAAP比AAP3-1对四氧嘧啶引起的小鼠实验性糖尿病的防治作用更强。表明AAP3-1和SAAP在降低糖尿病小鼠血糖的同时可能促进葡萄糖转化为肝糖原。增加肝糖原合成,促进糖的合成代谢,有可能是AAP3-1和SAAP降血糖的途径之一。
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