异鼠李素对过氧化氢所致内皮细胞损伤的保护作用

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目的:研究异鼠李素对H2O2所致人脐静脉内皮细胞株ECV304氧化性损伤的保护作用及其作用机制。方法:采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304,用MTT法筛选H2O2致细胞损伤的最佳浓度,在模型的基础上,用MTT法测定异鼠李素对内皮细胞相对活力的影响;ELISA法检测内皮细胞培养液t-PA和PAI-1含量;RT-PCR技术测定PAI-1 mRNA的相对表达;ELISA法检测内皮细胞培养液vWf和TM含量;流式细胞仪测定内皮细胞坏死率和平均荧光强度的变化;荧光分光光度法测定内皮细胞培养液中LDH的含量;Western Blot法测定内皮细胞caspase-3的活性;共聚焦激光扫描显微镜测定细胞内游离钙离子浓度的变化。结果:与H2O2损伤后的模型组相比,异鼠李素可以抑制PAI-1的分泌,升高t-PA和PAI-1的比值,并能下调PAI-1mRNA的表达;异鼠李素可以使培养液中vWf和TM含量减少,降低内皮细胞坏死率和平均荧光强度,减少培养液中LDH的含量;异鼠李素可以降低caspase-3活性,减少细胞内游离钙离子浓度的增加幅度。结论:异鼠李素具有内皮细胞保护作用,其保护作用机制与其抑制细胞内钙离子浓度的升高和其降低caspase-3的活性有关。
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