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本论文研究建立了致敏性青霉素降解物—青霉噻唑酸的胶体金免疫层析试纸条和免疫亲和凝胶检测柱两种定性检测方法。采用柠檬酸三钠还原法制备了17nm胶体金,优化制备金标抗体的最佳pH为9,标记抗体量为36μg。包被抗原和羊抗兔二抗分别作为检测带和质控带包被在硝酸纤维素膜上。金标记抗体喷涂在结合释放垫上,制成青霉噻唑酸胶体金免疫层析快速检测试纸条。通过对试纸条工作条件的优化确定最优条件为：金标抗体的稀释倍数为1：5,包被抗原的稀释倍数为1：1,羊抗兔二抗稀释倍数为1：100,包被原稀释液中甲醇浓度为3%。选择硝酸纤维素膜Millipore HF180作为固相载体。对硝酸纤维素膜不进行封闭处理。选择金标结合释放垫处理液为含有0.5%TritonX-100、0.1%PVP、2%BSA和5%蔗糖的PB缓冲液。样品稀释液为含5%甲醇的PB缓冲液。建立了青霉噻唑酸胶体金免疫层析试纸条检测方法。方法的检测限为试纸条检测线颜色与质控线颜色通过目视可观察到的明显差别时青霉噻唑酸的浓度。最终确定方法目视检测限为10μg/L,检测时间为10min。与氯霉素、三聚氰胺等其他牛奶中常检药物均无交叉反应,特异性良好。牛奶和奶粉样品经简单离心处理后通过试纸条检测,检测限分别为10μg/L和40μg/kg。以琼脂糖凝胶为固相载体,通过抗体和溴化氰活化的琼脂糖凝胶偶联制备抗体胶作为检测层,HRP多克隆抗体与溴化氰活化的琼脂糖凝胶偶联制备HRP抗体胶作为质控层,制备免疫亲和凝胶检测柱。并对工作条件进行了优化,最终确定最优工作条件为：抗体胶稀释倍数为1：10,抗HRP胶稀释倍数为1：200,酶标稀释倍数为1：10000,样品稀释液为pH5.7的PBS,清洗体积为5mL。建立了青霉噻唑酸免疫亲和凝胶检测柱分析方法。方法检出限为检测层蓝色消失时青霉噻唑酸的浓度,为10μg/L,整个检测过程不超过10min。与氯霉素等常见抗生素均无交叉反应,特异性良好。选取了牛奶作为检测样品,样品经过离心后直接检测,牛奶样品检测限为10μg/L采用ELISA实验验证了所建立的免疫层析试纸条分析方法和免疫凝胶检测柱分析方法的准确性。结果表明试纸条和检测柱在其检测范围内与ELISA检测结果一致性较好,实验结果稳定可靠。本实验建立的青霉素降解物—青霉噻唑酸的两种定性免疫分析方法操作简单,灵敏度高,检测结果易于判定,无需仪器,可作为青霉噻唑酸残留现场检测的有效筛检手段。