排钱草总生物碱抗肝纤维化作用机制的研究

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tcliany
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目的:研究排钱草总生物碱抗肝纤维化作用的机制。  方法:采用MTT法检测排钱草总生物碱对HSC-T6及HSC-LX2细胞增殖的影响;采用Elisa法检测排钱草总生物碱对HSC-T6及HSC-LX2细胞COLⅠ、COLⅢ、COLⅣ、TGF-β1、PDGF含量的影响;采用RT-PCR技术测定排钱草总生物碱对HSC-T6细胞COLⅠ、COLⅢ、COLⅣ、TGF-β1、PDGF mRNA表达的影响;采用WB技术测定排钱草总生物碱对HSC-T6细胞TGF-β1、PDGF-BB蛋白表达的影响;流式细胞术检测排钱草总生物碱对HSC-T6细胞凋亡水平及周期变化的影响。  结果:MTT法结果表明,排钱草总生物碱对HSC-T6及HSC-LX2细胞增殖具有抑制作用,排钱草总生物碱浓度在40~11.9μg.ml-1时对HSC-T6细胞增殖与对照组相比无显著抑制作用(P>0.05),排钱草总生物碱浓度在42.2~13.4μg.ml-1时对 HSC-LX2细胞增殖与对照组相比无显著抑制作用(P>0.05);Elisa结果显示排钱草总生物碱40μg·mL-1与空白组比较可明显抑制HSC-T6及HSC-LX2细胞COLⅠ、COLⅢ、COLⅣ、TGF-β1、PDGF的分泌(P<0.05~0.01)。RT-PCR结果显示与空白对照组相比,排钱草总生物碱40μg·mL-1可使HSC-T6细胞COLⅠ、COLⅢ、COLⅣ、TGF-β1、PDGF mRNA表达明显下调(P<0.05~0.01);WB结果显示排钱草总生物碱40μg·mL-1与空白对照组相比可明显降低细胞TGF-β1、PDGF蛋白的表达(P<0.05~0.01);40、20、10μg·mL-1排钱草总生物碱作用于HSC-T6细胞48h后,流式细胞检测结果显示对细胞周期以及早期凋亡无影响,与空白对照组比较P>0.05。  结论:排钱草总生物碱对HSC-T6及HSC-LX2细胞的增殖具有抑制作用,在无毒浓度下对HSC-T6及HSC-LX2细胞分泌COLⅠ、COLⅢ、COLⅣ、TGF-β1、PDGF具有抑制作用,并可下调COLⅠ、COLⅢ、COLⅣ、TGF-β1、PDGF mRNA的表达水平以及TGF-β1、PDGF-BB蛋白表达水平。
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