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目的： 检测HBV感染后慢性乙型肝炎、肝炎后肝硬化及肝癌患者外周血淋巴细胞HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ类分子表达，建立检测相应患者淋巴细胞内HLA-A mRNA方法；应用人IL-2刺激患者淋巴细胞并进行LDH释放试验；探讨慢性乙型肝炎、肝炎后肝硬化、肝癌患者外周血淋巴细胞HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ类抗原分子在宿主细胞免疫状态中的作用，对患者细胞免疫功能紊乱机制提供新的思路。 方法： 1、流式细胞术检测外周血淋巴细胞表面HLA-Ⅰ、Ⅱ类分子： 淋巴细胞抗体的标记：取四支试管，标记为HLA-Ⅰ-Ctr、HLA-Ⅱ-Ctr、HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ；取同型对照液IgG1-FITC 10ul分别加入HLA-Ⅰ-Ctr、HLA-Ⅱ-Ctr管中，分别取10ulHLA-ABC-FITC、HLA-Ⅱ-FITC-加入HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ管中；各管中加入100ul抗凝全血。以标准微球调整仪器，以HLA-Ctr管做阴性对照。在前散射和测散射Dotplot二维图中，划出淋巴细胞区，收集10~4个细胞，然后对淋巴细胞作FITC荧光强度检测，荧光强度以对数放大，光反射数据存软盘，全部数据用CellQuest Plot软件进行单色荧光参数获取及分析。 2、RT-PCR检测外周血淋巴细胞HLA-A mRNA含量：根据GenBank中公布的HLA-A基因序列，选取基因非多态区域外显子4，5的部分碱基，设计表达HLA-A基因位点的上下游引物，分别标记为p1，p2，外周血淋巴细胞(PBL)的提取：提取的RNA与不同的引物组合置于RT-PCR反应体系中扩增，以539bp的β-actin作为内参照，扩增产物在2％琼脂糖凝胶上电泳，筛选与预期片段相吻合的特异性引物。将上述PCR扩增产物进行电泳，以1.5％琼脂糖凝胶，电压