PPARγ激动剂对成骨细胞Smad2/3途径的代谢调控研究

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目的:通过研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂吡咯列酮(pioglitazone,PGZ)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的成骨细胞Smad2/3蛋白及mRNA表达水平的影响,了解PPARγ激动剂对大鼠成骨细胞代谢的调控机制,以期明确其在骨质疏松症发生过程中的作用。方法:取新生24h的SD大鼠乳鼠的颅骨,酶消化法培养获得成骨细胞,经茜素红钙结节染色和碱性磷酸酶染色鉴定为成骨细胞,MTT法观察PGZ对成骨细胞的增殖影响,AKP活性试剂盒检测PGZ对成骨细胞分化能力的作用,细胞免疫荧光和WesternBlot(蛋白印迹)法分别观察PGZ对TGF-β1诱导的成骨细胞Smad2/3、P-Smad3蛋白表达水平的影响及实时定量PCR(RT-PCR)法检测对Smad2/3mRNA的表达水平。结果:PGZ对成骨细胞的增殖无明显影响作用(P>0.05),但能抑制成骨细胞的碱性磷酸酶活性(P<0.05);TGF-β1(5ng/ml)干预成骨细胞24h后,不同浓度的PGZ处理组的Smad2/3蛋白及P-Smad3蛋白的表达水平均有所降低,Smad2/3mRNA的表达水平也有所下降。结论:PPARγ激动剂PGZ能抑制成骨细胞的分化,其机制可能为通过抑制TGF-β1诱导的Smad2/3的表达来阻断TGF-β1/Smads信号途径。提示在成骨细胞中PPARγ与TGF-β1/Smads有关联,PPARγ在骨质疏松症的发生发展过程起着至关重要的作用。
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