论文部分内容阅读
目的:
神经系统瘤在国内外报道较多,其发病率也日趋增多,各家统计的发病率也有较大差异。胶质瘤是最常见的颅内原发性肿瘤,大多呈膨胀性和浸润性生长,预后相对较差。有报道称占胶质瘤半数的胶质母细胞瘤患者1年生存率约为30%,5年生存率不足5%。由于胶质瘤呈浸润性生长,与正常脑组织没有明显界限,多数不限于一个脑叶,向脑组织外呈指状深入破坏脑组织,故无法从细胞学完全切除肿瘤。放疗的疗效不一,化疗的效果目前也尚不肯定,而且存在着手术后的胶质瘤复发存在级别增高的趋势。肿瘤细胞裂解物是模拟体内肿瘤微环境的最简单最合适的办法,本文研究目标是肿瘤细胞裂解物(tumor cell lysates)对肿瘤自身的生物学行为的影响及其研究的意义。
材料和方法:
一、肿瘤细胞裂解物的制备。
取对数生长期的肿瘤细胞,细胞浓度约1*106时,PBS冲洗两次后用胰酶消化细胞,反复吹打制悬离心2000rpm/s,10分钟后去上清,直接置入-70度冰箱,隔夜后取出迅速移入室温融化。这个过程反复重复3次即可。
二、实验细胞的培养。
肿瘤细胞系U87和U251购置为上海肿瘤细胞研究所,在10%胎牛血清的DMEM高糖培养基中培养,三天更换一次培养基。
三、检测方法。
通过MTT比色法对经过肿瘤细胞裂解物干预后的肿瘤细胞的OD的测量和对照组的比较,绘制曲线并进行统计学分析。
通过transwell法对经过肿瘤细胞裂解物干预后的肿瘤细胞对基质胶的穿透能力进行计数和对照组的比较,并进行统计学分析
四、统计学处理。
应用SPSS13.0统计软件进行统计学处理,对资料进行独立样本t检验,以P<0.05为差异具有统计学意义
结果:
U87细胞系经过肿瘤细胞裂解物干预后与对照组相比在第二及第三天差异明显,以及存在干预浓度越高OD值差异越显著,(P<0.05),第一天及第四天无统计学意义。U251细胞系经过肿瘤细胞裂解物干预后与对照组相比在第2,3天及第4天差异显著,亦存在干预浓度越高OD值差异越显著。(P<0.05)u87的侵袭能力在第2天和第3天达到顶峰,干预组与对照组差别明显,第2,3,4天P值均<0.05。U251干预后的肿瘤细胞仍然在第2,3,4天的侵袭能力与对照组相比强的还是很明显。
结论:
1、证实了肿瘤细胞裂解物具有促进肿瘤细胞自身增殖的作用。
2、证实了经过肿瘤细胞裂解物干预后的肿瘤细胞具有更强的侵袭能力。