黄淮海地区农田木霉菌资源收集、鉴定与多功能评价

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本论文研究了从黄淮海地区农田土壤分离的木霉菌资源的多样性,并进行促生、拮抗、酶活以及定殖生态学等方面的研究。结果如下:(1)通过稀释涂布平板法对从河北、河南、山东、天津、北京采集的276份农田土壤样品进行分离,纯化得到了418株木霉菌。通过对木霉菌株的形态学和ITS序列的比对分析,分属12种:T.harzianum(248株)、T.atroviride(61株)、T.longibrachiatum(37株)、T.brevicompactum(31株)、T.asperellum(12株)、T.koningiopsis(9株)、T.aureoviride(5株)、T.ctrinoviride(4株)、T.virens(4株)、T.pleuroticola(3株)、T.konigii(2株)、T.aggressivum(2株)。(2)通过多样性分析,结果发现,第一优势种都是T.harzianum,第二优势种开始出现区别,如T.atroviride是河北省的优势种;河T.brevicompactum是河南省的优势种;T.atroviride是山东省的优势种;小麦地是T.longibrachiatum,玉米是T.atroviride。春季T.longibrachiatum,夏季是T.atroviride。(3)通过生态位分析结果表明:哈茨木霉(T.harzianum)的生态位宽度最大,属于该地区的优势种群。并且,不同木霉种类如T.longibrachiatum与T.harzianum,T.harzianum与T.atroviride,T.atroviride与T.longibrachiatum之间存在较高的生态位重叠。(4)通过对418株木霉菌进行促生和平板拮抗实验,筛选出促生菌76株,164株对5种病原菌抑制率的50%的木霉菌,其中达到60%的共34株霉。对黄瓜枯萎病的抑制率最高为70.86%,草莓枯萎病为69.35%,玉米茎腐病为81.66%,莴苣菌核病为87.84%,小麦纹枯病为82.69%。(5)结合促生和平板拮抗实验,选取15株木霉进行盆栽实验,结果发现有5株木霉的促生效果存在差异,237-1P2菌株对植株的整体均具有明显的促生效果,158-2M1、223-2M1则对植株的地上部分促生效果明显,其中223-2M1促进了细根的伸长,176-1M1对地下根系的伸长具有明显的促进作用,210-2P1菌株则促进了粗根的伸长。(6)对选取的15株木霉菌进行纤维素酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶和蛋白酶的定量测定,结果发现,几丁质酶活最大的菌株是176-1M1,葡聚糖酶活最大的菌株是219-1P1,蛋白酶活最大的菌株是199-2P3,纤维素酶活最大的是223-2M1。根据Pearson相关性检验,在p<0.05的水平上,几丁质酶活与小麦纹枯病(r=0.669)和玉米茎腐病(r=0.553),纤维素酶活与小麦纹枯病(r=0.839)和玉米茎腐病(r=0.651),蛋白酶活与黄瓜枯萎病(r=0.694)和玉米茎腐病(r=0.639)之间具有一定的相关性。此外,葡聚糖酶活与各抑菌率之间未表现出相关性。(7)研究哈茨木霉237-1P2在土壤中的定殖生态分布,结果表明,接种在土壤5-10cm的木霉能最大限度的发挥定殖作用,在第7d就能够扩散到15-20cm和25-30cm,并且能够形成有效定殖,随后在第14d达到最大,其中无植物的2-4cm和6-8cm分别比初始值提高2.15、2.59倍,有植物的2-4cm和6-8cm分别比初始值提高3.04、2.74倍;土壤中的微生物细菌量随着木霉菌的增加而增加,真菌的变化与木霉的变化趋势相反,放线菌的变化基本是15-20cm和25-30cm土层的菌量高于上层。
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