恶性肿瘤已超过心脑血管疾病而跃居为人类致死疾病的首位，且随着环境污染、不良生活方式等问题的日趋加剧，肿瘤的发病率和死亡率仍呈逐年增加的趋势，而现有的传统疗法因其局限性致使肿瘤患者的治愈率未有明显提高，因此，如何提高肿瘤防治水平和寻找治疗肿瘤的新方法已成为科学家和临床医学家亟待解决的问题。血管生成疗法——通过抑制新生血管的生成抑制肿瘤组织内肿瘤细胞的生长和转移，因其特异性强、无耐药性等优点为治疗癌症开辟了新途径。吴新荣等发现麦考酚酸（MPA）有典型的血管抑制作用，是一个具有开发前景的抗肿瘤药物。本文研究目的：对麦考酚酸的血管抑制机理做深入研究，寻找出麦考酚酸抑制血管生成的潜在的作用靶基因。　　 研究内容：（1）基质金属蛋白酶几乎能降解细胞外基质中的各种蛋白成分，破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障，在血管生成中起关键性作用。本文通过同源性分析找出两个斑马鱼基质金属蛋白酶基因MMP15a和MMP11b；（2）本实验首先从斑马鱼胚胎中提取总RNA，通过RT-PCR克隆出MMP15a和MMP11b基因，然后把扩增产物和载体PGEM-Teasy连接，转化感受态大肠杆菌，筛选鉴定后送测序。RT-PCR结果表明扩增出预期大小的DNA片断，测序结果确认就是目的片断，且插入位置正确。提取构建好的质粒PGEM-T-MMP11b和PGEM-T-MMP15a并进行单酶切线性化后，体外转录制取MMP11b和MMP15a的RNA探针，通过斑马鱼整体胚胎原位杂交看基因在斑马鱼胚胎早期的时空表达图；（3）通过药物处理斑马鱼胚胎，寻找出合理的麦考酚酸浓度以抑制斑马鱼节间血管的生成，既使斑马鱼胚胎整体发育正常而且节间血管收到抑制；（4）麦考酚酸药物处理斑马鱼胚胎，通过RT-PCR定性的研究麦考酚酸影响基因MMP11b和MMP15a在斑马鱼胚胎中的表达；（5）通过PXT7载体亚隆，体外转录合成MMP11b和MMP15a的mRNA，通过显微注射技术，分别注射MMP11b和MMP15a的mRNA与MPA处理的斑马鱼胚胎中，斑马鱼节间血管的恢复情况。结果：（1）从斑马鱼胚胎中克隆出MMP11b和MMP15a的cDNA全长序列，分析表明MMP15a是含有651个氨基酸组成的蛋白序列MMP11b是含有506个氨基酸组成的蛋白序列。（2）本章通过MPA药物处理斑马鱼胚胎实验，得到了MPA抑制斑马鱼ISV血管生成的合适浓度为1．1μg/ml，在此浓度下，斑马鱼节间血管血管发育被抑制且斑马鱼胚胎整体发育没有影响。以1．1μg/ml的MPA处理斑马鱼胚胎，RT-PCR分析，得出MPA抑制MMP15a和MMP11b的表达。（3）通过显微注射MMP15a和MMP11b基因的mRNA，并和MPA对照处理，结果显示斑马鱼胚胎分别加入0．5μg/ml MMP15a和0．6μg/ml MMP11b能显著恢复斑马鱼胚胎节间血管的生成。　　 结论：MPA通过抑制MMP15a和MMP11b mRNA的形成继而抑制了斑马鱼节间血管的生成。