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研究目的:探讨γ-生育三烯酚(γ-tocotrienol,γ-T3)通过调节人胃癌细胞能量代谢抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡作用机制研究。研究方法:1.用不同浓度(0、15、30、45、60和80μmol/L)的γ-T3及α-生育酚(α-TOC)作用SGC-7901和MGC-803细胞24h、48h后,采用CCK8法检测细胞增殖能力的变化。2.用30μmol/L的γ-T3作用SGC-7901和MGC-803细胞0、12、24h后,采用FCM法检测细胞凋亡情况。3.用30μmol/L的γ-T3作用SGC-7901和MGC-803细胞0、12、24h后,采用JC-1荧光探针法检测细胞的线粒体膜电位(Δψm)变化情况;用0、20、30μmol/L的γ-T3作用SGC-7901和MGC-803细胞0、4h后,采用线粒体压力检测试剂盒,检测细胞的氧耗率(oxygen consumption rate-OCR)水平;用30μmol/L的γ-T3作用SGC-7901和MGC-803细胞0、12、24h后,采用DCFH-DA荧光探针法,检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,同时采用CCK8法检测活性氧去除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对γ-T3处理过的细胞的增殖能力的影响。4.用30μmol/L的γ-T3作用SGC-7901和MGC-803细胞0、4、24h后,采用免疫印迹技术分别检测NDUFB8(复合体I的亚基)、SDHB(复合体II的亚基)、UQCRC2(复合体III的亚基)、COX4I1(复合体IV的亚基)和ATP5F1A(复合体V的亚基)的蛋白表达水平。5.用0、20、30μmol/L的γ-T3作用SGC-7901和MGC-803细胞0、4h后,采用糖酵解速率检测试剂盒,检测细胞的细胞外酸化率(extracellular acidification rate-ECAR)。6.用30μmol/L的γ-T3作用SGC-7901和MGC-803细胞0、4h后,采用ATP速率检测试剂盒及ATP检测试剂盒,检测细胞内ATP速率的变化及总ATP水平的变化。研究结果:1.CCK-8结果显示,随γ-T3作用浓度的增加,SGC-7901和MGC-803两种细胞的增殖抑制率均增高(p<0.05,p<0.01,p<0.001);随α-TOC作用浓度的增加,SGC-7901和MGC-803两种细胞的增殖抑制率没有明显改变(p?0.05)。2.凋亡实验结果发现,随γ-T3作用时间的延长,SGC-7901和MGC-803两种细胞的凋亡率均增高(p<0.01,p<0.001)。3.线粒体膜电位结果显示,随γ-T3作用时间的延长,SGC-7901和MGC-803两种细胞的线粒体膜电位水平均降低(p<0.05,p<0.01)。OCR结果显示,随γ-T3作用浓度的增加,人胃腺癌SGC-7901和MGC-803细胞的OCR水平均降低(p<0.05,p<0.01)。活性氧检测结果显示,随γ-T3作用时间的延长,人胃腺癌SGC-7901和MGC-803细胞中的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平均升高。同时,CCK8结果显示NAC可以显著降低γ-T3对细胞的抑制率(p<0.05,p<0.01)。4.免疫印迹技术结果显示,γ-T3可以明显降低NDUFB8、SDHB的蛋白水平,而对UQCRC2、COX4I1、和ATP5F1A没有影响(p<0.05,p<0.01)。5.ECAR结果显示,随γ-T3作用浓度的增加,SGC-7901和MGC-803两种细胞的糖酵解速率均代偿性升高(p<0.01,p<0.001)。6.ATP检测结果显示,随γ-T3作用浓度的增加,SGC-7901和MGC-803两种细胞的ATP水平均降低(p<0.05)。研究结论:γ-T3具有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其机制可能与γ-T3抑制人胃癌SGC-7901和MGC-803细胞的NDUFB8与SDHB的蛋白水平,进而增加ROS的产生和降低ATP的水平有关。