【摘 要】
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博普总碱是从罂粟科博落回属植物博落回[Macleaya cordata（Willd）R.Br.]中提取而制成的一个中兽药产品,其主要药效成分为原阿片碱（Protopine,PRO）和别隐品碱（allocryptopine,ALL）,此外还含有少量的血根碱（Sanguinarine,SA）和白屈菜红碱（chelerythrine,CHE）。该产品对猪和鸡等动物具有良好的杀菌、消炎、促生长、调整肠道菌
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博普总碱是从罂粟科博落回属植物博落回[Macleaya cordata（Willd）R.Br.]中提取而制成的一个中兽药产品,其主要药效成分为原阿片碱（Protopine,PRO）和别隐品碱（allocryptopine,ALL）,此外还含有少量的血根碱（Sanguinarine,SA）和白屈菜红碱（chelerythrine,CHE）。该产品对猪和鸡等动物具有良好的杀菌、消炎、促生长、调整肠道菌群等作用。到目前为止,关于PRO、ALL、SA和CHE在鸡组织中的残留检测方法和相关的残留规律研究尚无文献报道。因此为了更好的指导博普总碱在临床兽医上的应用,对该产品作出前瞻性的安全性评价,本文开发了PRO、ALL、SA和CHE在白羽肉鸡组织中的检测方法,并对博普总碱在AA型白羽肉鸡血浆中药代动力学和组织中残留消除规律进行了研究。本试验以延胡索乙素（TET）作为内标,建立了测定白羽肉鸡组织中PRO、ALL、SA和CHE的高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）法,并完成了相应的方法学验证。方法学考察结果显示,PRO、ALL和CHE在0.5~200μg/kg的浓度范围内呈良好线性（r2≥0.999）,SA在2~200μg/kg的浓度范围内稳定。PRO、ALL和CHE的定量下限（LLOQ）均为0.5μg/kg,检测限为0.2μg/kg;SA的定量下限为2μg/kg,检测限为1μg/kg,所有目标分析物的回收率在86.61%~111.17%,精密度和准确度均≤15%。该方法操作简单,经济省时,且在专属性、准确度和精密度、方法回收率、基质效应、稳定性等方面均符合方法学考察要求。将本实验室建立的PRO、ALL、SA和ALL在鸡血浆中的检测方法以及本文建立并验证的白羽肉鸡组织中的检测方法成功应用于PRO和ALL在白羽肉鸡体内的药代动力学和组织残留消除规律研究。以“博普总碱”低(50 mg·kg-1)、中(200 mg·kg-1)、高(800 mg·kg-1)剂量分别混匀于饲料中口服给药,从一日龄开始标准化饲养至36日龄,禁食12小时后同时给予等量相应组别的饲料,分别在不同时间点于翼下静脉窦采血约0.3 m L。药代动力学参数显示低、中、高剂量的PRO在鸡体内最大血药浓度分别为4.26±2.96,18.33±9.72和35.04±27.77μg·L-1,药时曲线下面积AUC（0-∞）分别为3.60±1.81,50.48±51.07,87.89±15.17（μg·L-1）·h;低、中、高剂量的ALL在鸡体内达峰时间分别为0.37±0.40,0.6778±2.52和0.84±0.27h,药时曲线下面积AUC（0-∞）分别为0,47.51±15.57,72.94±92.04（μg·L-1）·h。结果表明PRO和ALL在鸡体内吸收快,消除快,在给药10小时后血药浓度即低于定量限（0.78 ng/ml）。采血完成后,肉鸡进入一周的洗脱期。饲养至43天,在禁食2小时、休药第1天、第3天、第5天和第7天分别采集血液、心、肝、肾、胸肌、腿肌以及盲肠内容物样品。检测结果显示低、中剂量组下的PRO和ALL在不同组织中有较低浓度的残留,但在休药第7天后都低于定量限,其中以肝、肾组织的残留浓度最高,说明肝、肾是PRO和ALL的靶组织。高剂量组在休药7天后心、肾、胸肌组织中仍有部分残留,浓度在0.6~1.16μg/kg。残留结果证明以博普总碱长期饲养肉鸡是安全的,说明该药物具有很高的安全性。本试验建立了PRO、ALL、SA和CHE在白羽肉鸡组织中的液质联用定量方法,并研究了PRO和ALL在白羽肉鸡体内的药代动力学情况和博普总碱在肉鸡组织器官中的残留消除规律,为博普总碱的临床使用提供理论指导和技术支撑,为博普总碱的安全性评价作出前瞻性研究。
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