杜梨（Pyrus betulifolia Bge.）原产于我国，是我国北方地区梨的主要砧木。具有适应性强，生长旺盛，抗旱、涝、碱、盐力均较强等特性。但其树体高达，实生苗主根发达，苗期侧根少而弱，另外杜梨扦插不易生根，这些特点增加了育苗的难度，也限制了其进一步的发展。因此本研究以杜梨为试验材料，以农杆菌EHA105为媒介，把具有发根和矮化作用的rolB基因导入杜梨中,通过对影响杜梨子叶离体再生不定芽和根癌农杆菌（Agrobacterium Tumefaciens）EHA105介导的遗传转化效率的相关因素的研究，建立了杜梨子叶不定芽再生系统和遗传转化系统，并成功将rolB基因导入杜梨的基因组中。本试验主要研究结果如下：1．以未经过胚培养的子叶、经过胚培养发生的子叶以及下胚轴为外植体，分析了三种外植体再生不定芽的能力，结果表明未经过胚培养的子叶的再生能力最强，经过胚培养的子叶次之，而下胚轴的再生能力最低。2．通过分析激素种类和浓度、暗培养时间、基本培养基类型、蔗糖浓度等因素对杜梨子叶再生的影响，确立了杜梨子叶简易高效的再生体系：解除休眠的种子去除外种皮后，经0.1%HgCl2消毒8min，切去胚芽、胚轴和胚根，取出两片子叶。以NN69为基本培养基，添加激素6-BA5.0mg/L、NAA0.05mg/L，以及30g/L蔗糖，将子叶水平接种在培养基上，不经过暗培养，光照培养40d后，再生频率和平均不定芽发生数量分别达到68.9%和4.80。3．在农杆菌介导的杜梨遗传转化体系中，在选择培养时以20mg/L的卡那霉素作为最佳选择压。而在进行转化体的筛选培养时宜在继代培养基中添加50mg/L卡那霉素。4．通过对转化过程中的农杆菌浓度、侵染时间、预培养时间、共培养时间等因素进行分析，建立了一条杜梨子叶的最佳转化途径：杜梨子叶在再生培养基上黑暗预培养3d；农杆菌菌液过夜震荡培养至对数生长期，OD600值0.7，侵染时间7min，共培养3d，先使用Cef脱菌处理，接种于选择培养基上，附加20mg/L Km和500mg/LCef，最高可获得11.8%的抗性芽再生率。5．获得的抗性芽在筛选培养基上继代培养3代后进行PCR检测，结果表明，在检测的植株中有16个阳性植株，初步表明外源rolB基因成功整合到杜梨基因组中。