近年来许多起调控作用的小分子RNA被发现，真核生物的基因表达中，miRNA起着非常关键的调控作用．在胚胎发生过程中，许多参与组织特异性的miRNA功能已被证明，但关于miRNA在胚胎性别分化阶段作用的研究尚未见报道。鸡胚作为研究脊椎动物胚胎发育生物学经典的模型，运用已有几十年的历史。但相比其它的脊椎动物，对于家鸡中的miRNA数量、种类和表达谱我们仍知之甚少，尤其是胚胎期的性别分化阶段。 本研究通过对性别分化前后时期家鸡胚胎样品(4天龄雌、雄和7天龄雌、雄)的小RNA纯化，反转录PCR扩增建立cDNA文库，利用Solexa/ Illumina高通量测序方法对其测序，根据目前已公布的miRNA注释信息对所得小RNA序列注释分类，并从已知miRNA及其前体的序列的保守性和结构特点，以生物信息学方法从中筛选、甄别可信度高的miRNA。随后我们统计miRNA的表达量，构建表达谱并进行显著差异表达分析。最终得到miR-148a，h005-5p，h014-5p，miR—217在雌雄表达中具有显著差异，我们认为这些miRNA很可能参与鸡胚的性别分化调控。为以后进一步实验验证性和揭示鸟类的性别分化机制提供非常主要的依据。