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植物在特定生理时期会产生一些次生代谢产物，这些次生代谢产物往往具有重要的药用价值。长春花(Catharanthusroseus(L.)Don)生物碱就是这样的一类次生代谢产物，如抗高血压药物阿玛碱(Aiamalicine)与蛇根碱(Serpentine)，抗肿瘤药物长春碱(Vinblastine)和长春新碱(Vincristine)等。 长春花生物碱属于吲哚萜类生物碱(TerpenoidIndoleAlkaloid，TIA)，普遍认为这类化合物的生物合成涉及两大代谢途径：合成吲哚类化合物的莽草酸途径和合成类萜的环烯醚萜途径。迄今，人们已分离到约30个与长春花生物碱生物合成有关的酶和基因，并对这些酶和基因的功能进行了研究。但是植物次生代谢的调控机制极为复杂，远非几个关键酶所能控制。因此，从调控角度研究其生物合成过程对阐明其分子机制显得尤为重要 本研究采用茉莉酸甲酯(MeJA)和真菌诱导子(YE)对长春花悬浮细胞进行处理，检测18个时间点上多个吲哚萜类生物碱代谢途径关键基因在转录水平的表达情况。通过分析MeJA和YE对这些基因转录水平的调控，探讨基因问潜在的相关性。 主要研究结果如下： 1.对长春花荧光定量PCR分析中候选内参基因进行了系统研究，分析评价了15个内参基因在不同条件下的稳定性。所有引物经过普通PCR分析以及荧光定量PCR进行溶解曲线、扩增效率分析，均达到了荧光定量PCR技术的要求；扩增效率在95％-105％之间，溶解曲线峰单一而尖锐，明显区别于NTC组。 2.应用GeNorlm与NormFinder软件确定了长春花悬浮细胞在：MeJA、YE、MeJA与YE、以及长春花植株不同组织间稳定表达的内参基因组合。确定了ELF2、ELF1、GA2、RSP9等几个最为稳定的内参基因以及以上几种情况下应当选择的最佳内参基因个数。 3.通过测定长春花吲哚萜类生物碱生物合成途径中ORCA3、G10H等共15个关键基因在转录水平的变化，分析了每个基因在MeJA与YE诱导后表达变化趋势。首次较全面地分析了DXS、CPR、ASα、SLS、SGD、ORCAs、ZCTs、GBFs在YE诱导下的转录表达情况。 4.应用UPLC-MS测定了MeJA与YE诱导下长春花吲哚萜类生物碱生物合成途径过程中文多灵等七种关键化合物的含量变化情况。MeJA诱导后，色胺、开联番木鳖苷、四氢鸭脚木碱和阿玛碱、蛇根碱、长春质碱、文多灵的合成均有提高；YE诱导后，色胺、开联番木鳖苷、长春质碱、文多灵的含量几乎与对照组一致，而四氢鸭脚木碱和阿玛碱、蛇根碱的含量则大幅降低。