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背景及目的：联合放化疗目前是治疗肺鳞癌患者的主要临床治疗模式,但有效率出现瓶颈现象,因此寻找新的、高效的、毒副反应小的抗肿瘤药物成为肿瘤基础和临床研究的热点。TRAIL是一种新型生物制剂,其可以诱导肿瘤细胞凋亡,对正常组织无明显损伤。但是多数肿瘤对其耐药,其原因机制有很多,有研究报道可能与其细胞表面死亡受体4(DR4)基因启动子甲基化有关,逆转基因甲基化可能提高TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡作用。因此本文以肺鳞癌为研究对象,探讨DR4基因启动子甲基化与DR4表达的关系,进一步研究DR4基因启动子甲基化状态是否会影响TRAIL对肺鳞癌细胞的诱导凋亡作用,为肺鳞癌的治疗提供新的治疗策略。方法：1、采用Elivision二步法检测临床组织DR4的表达情况；2、采用甲基化特异性PCR(MSP)检测临床组织DR4的甲基化状态；3、采用MSP法检测5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理肺鳞癌细胞株(H226、SK-MES-1、H520)前后DR4基因启动子甲基化状态；4、采用RT-PCR和Western blot法检测5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理肺鳞癌细胞株(H226、SK-MES-1、H520)前后DR4基因mRNA及蛋白表达情况；5、采用MTT法检测肺鳞癌细胞增殖抑制率；6、采用流式细胞仪检测肺鳞癌细胞凋亡率。结果：1、临床研究结果如下,甲基化特异性PCR (MSP)结果显示,在36例肺鳞癌患者中DR4基因启动子有80.6%处于甲基化状态,甲基化状态与肺鳞癌患者的年龄、性别、吸烟、病理分化程度、TNM分期、淋巴结转移等临床病理特征无相关性(P>0.05)。免疫组化结果表明,36例肺鳞癌患者中DR4低表达概率约为58.3%(36例中有21例),有4例为未表达,17例为低表达,10例为中高度表达,5例为高表达。同时研究还证实肺鳞癌DR4的表达水平与其基因启动子甲基化程度有关(P<0.05)。2、体外实验研究结果如下,MSP表明H226、SK-MES-1细胞DR4基因呈甲基化状态,其mRNA及蛋白均低表达,H520呈非甲基化状态,其mRNA及蛋白高表达；5-Aza-CdR干预后H226、SK-MES-1细胞DR4基因呈非甲基化状态,其mRNA及蛋白表达较前均显著上调,差异有统计学意义(P<0.05),H520仍呈非甲基化状态,其mRNA及蛋白表达量较前无明显差异。同时研究还证实TRAIL对H226、SK-MES-1细胞均存在不同程度的增殖抑制作用和凋亡作用,但不敏感,5-Aza-CdR干预后,H226及SK-MES-1细胞对TRAIL的敏感性较前均显著增高(P<0.05)。结论：肺鳞癌中普遍存在DR4甲基化修饰,导致DR4沉默或低表达,去甲基化药5-Aza-CdR可以逆转DR4基因启动子甲基化状态,使其表达上调,进而增加TRAIL诱导肺鳞癌细胞凋亡作用,5-Aza-CdR联合TRAIL可能是治疗肺鳞癌的一种新策略。