生物降解法处理石油污染被广泛赞同，以往的研究大多数集中在常温或高温环境下，若能得到石油污染土壤的耐低温高效降解菌种、得知其降解性能，可以为低温应用微生物修复技术提供基础。本文的研究目标是优选并鉴定石油污染土壤的耐低温降解菌种并得出石油降解优良菌种的耐低温降解性能，与此同时对比得出常温与低温条件下石油污染土壤微生物种类组成差异，主要研究方法与成果为：　　 在两种温度下（10℃和25℃），从大港油田长期污染的石油污染土样以原油为唯一碳源进行驯化，分别得到两条件下的石油降解功能菌，25℃条件下分离得到20株降解菌，10℃条件下分离得到31株降解菌，为石油污染的现场修复提供优良菌种。　　 分析和鉴定得到的石油降解菌时，聚合酶链反应（Polymerase chain reaction，PCR）直接以纯菌菌落为模板，用扩增细菌16S rDNA的一对通用引物（8f，1492r）对模板扩增，并用限制性内切酶RsaI和MspI对PCR产物进行ARDRA多态性分析。　　 使用ARDRA聚类统计后，经过数量和种类分析得出同种石油污染土壤通过采用相同的含油培养基、相同的驯化方式，在不同温度条件下驯化后，微生物组成和数量呈现显著差异。从数量上看，10℃条件下总细菌浓度为6．2×105CFU/ml；25℃条件下总细菌浓度为4×108 CFU/ml，相差3个数量级，可见低温使得细菌总数大大减少。从微生物组成上看，在两个温度下以原油为唯一碳源驯化，细菌多样性丰富，共包含了细菌域的19个类群。其中，25℃条件下得到8个OTUs，10℃条件下得到11个OTUs，低温条件下，微生物数量减少，但种类多样性反而可能增加；两种温度条件微生物种类组成的相似性低。　　 在研究菌种降解性能时，通过使用重量法和GC-MS法分析10℃条件下耐低温菌种对总石油烃（TPH）和各组分的降解性能：在液相降解条件下对所有已筛选菌种的降解率和生长量进行分析，培养20d后，菌种C1、D2、D9、D17、D24长势最好，其中低温筛选出的菌种D17和D24在10℃生长量增幅明显。D17和D24的20d生长量和降解率数值最高，D24和D17降解率分别为39．81％和47．64％；在土壤相条件下，投加D17和D24的体系均使土壤中的石油烃含量减少。通过分析典型菌种D24的GC-MS结果得出，投加菌种D24对饱和烃的降解产物影响不明显，可能的原因是样品已在土壤中原有微生物的降解条件下被部分降解，增加了单菌进一步降解的难度；投加菌种D24对芳烃组分有较大程度的影响，且D24对芳烃重质组分的降解性能高于对轻质组分的降解性能。