桃根皮腐解物成分鉴定及其降解菌筛选

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桃[Prunuspersica(L.)Batsch],蔷薇科桃属植物,是我国重要的核果类果树。因其色泽鲜艳,风味好,营养丰富而广受消费者喜爱。桃树连作障碍是生产中制约桃产量及品质的主要病害,也是世界各国普遍存在的桃树病害之一。而土壤中残根腐解产生的自毒物质积累是引起连作障碍的主要原因之一,因此本研究主要着眼于桃树根皮腐解物(decomposed liquid,DL)的成分和作用,以及土壤中的相关降解微生物。试验通过利用根皮腐解物作为唯一碳源或氮源,拟从桃树根际土中筛选出1-2株能高效降解桃树自毒物质的根际微生物,为缓解或解决生产中桃树连作障碍提供一定的理论基础。本论文的主要试验结果如下:  1.利用LC-MS方法在DL中检测到醇类、脂类、黄酮类、有机酸类、植物激素类、氨基酸及其衍生物等6类物质,共138种成分,其中多种成分曾被报道为化感物质。试剂盒法检测到DL中有CN-存在。  2.从桃树根际土中筛选到能够以DL为唯一碳源的菌株4株,以DL为唯一氮源的菌株3株。通过菌落和细胞形态观察,并结合16S rRNA基因测序,初步鉴定各菌株分别为Klebsiella oxytoca(WH-C1),Pseudomonas putida(WH-C2),Pantoea agglomerans(WH-C3),Flavobacterium johnsoniae(WH-C4),Enterobacter ludwigii(WH-N1),Acinetobacter calcoaceticu(WH-N2),Pseudomonas nitroreducens(WH-N3)。  3.以莴苣种子作为化感作用指示植物检验不同降解菌的DL降解产物毒性。结果表明不同降解菌的DL降解产物对莴苣种子的发芽率,发芽势和发芽指数的抑制作用明显减小,其中WH-N3的降解产物作用最显著。  4.WH-N3最适生长温度是20℃,最适生长pH值为6.0-7.0的微酸性环境,并且在外源添加葡萄糖和蛋白胨时,WH-N3的生长速度会显著加快。  5.WH-N3可以在8h内将初始浓度约为95mg/L的苯甲酸全部降解,将初始浓度为0.2mg/L的氰化物完全转化。实验室条件下,WH-N3可以在无外源能源物质添加的情况下,在连作土壤中生存90d之久,菌量约维持在106cfu/g土左右。  6.盆栽桃苗实验显示,DL处理会严重抑制桃苗的生长,而添加WH-N3后可以显著缓解DL对桃苗生长的毒害作用。
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