微切微克隆技术在B染色体分子遗传学研究中的应用 1.黑麦B染色体端粒相关序列克隆的研究

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该文以黑麦为材料,利用显微切割的方法,分离了黑麦10个B染色体端部片断,并利用合成的寡核苷酸引物(CCCTAAA)<,3>及该文建立的二级单引物序列PCR扩增方法,得到350bp,550bp两条清晰的扩增带.经Bal31-Southern杂交及染色体原位杂交检测证实此PCR产物为B染色体端粒相关序列,确证了(CCCTAAA)n简单重复序列也存在于黑麦B染色体上.原位杂交结果显示:此PCR产物只与B染色体长臂末端杂交,与其短臂末端不能杂交.绝大多数A染色体末端也有清晰的杂交信号,说明B染色体端粒相关序列和A染色体端粒相关序列具有同源性,为B染色体起源于A染色体的观点提供了证据.
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