研究目的MicroRNAs(miRNAs)是一类新发现的非编码小RNA分子,与个体发育、干细胞分化和疾病发生密切相关.尤其是在人类肿瘤的发生发展过程中,miRNA也扮演着重要的角色,它们具有癌基因或抑癌基因活性,能够通过负性调节其靶基因的表达水平来发挥作用。近年来研究发现,某些miRNA直接或间接调控肿瘤的增殖和转移过程。本实验旨在研究miR-20a对肺癌A549细胞生长表型以及转移情况的影响,并确定miR-20a直接作用的靶基因,以阐明miR-20a对肺癌发生和发展发挥作用的分子机制。方法首先利用MTT、集落形成实验和transwell侵袭实验检测封闭和过表达miR-20a对A549细胞增殖及侵袭转移能力的影响。随后,通过半定量RT-PCR和Western blot实验验证miR-20a功能受抑制和增强后癌细胞中靶基因mRNA水平和蛋白水平的变化,进一步验证miR-20a对靶基因的调控作用。结果在人肺癌细胞系A549细胞中,封闭内源性miR-20a后,细胞活性基本不受影响,但集落形成能力和细胞的转移能力明显降低。过表达miR-20a后,细胞活性基本不受影响,但集落形成能力和细胞的转移能力明显升高。miR-20a功能受抑制的肺癌细胞,APP和CCND1基因的mRNA表达水平有明显升高,APP和CCND1蛋白表达水平增高。过表达miR-20a功能的肺癌细胞,结果则相反。结论在人肺癌细胞系A549中,miR-20a能够促进细胞转移,并缓慢促进细胞增殖,并验证了直接作用的靶基因是APP和CCND1。同时对miR-20a在肿瘤增殖转移过程中的调控机制进行探索,为进一步了解肺癌的增殖和转移特点及调控机制提供了新的实验依据。